微生物检测用培养基质量控制方法

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1、微生物检测用培养基质量控制方法王美莲云南省开远市人民医院检验科云南红河661600【摘要】培养基是进行生物实验时需要的人工制养料，主要为动物、植物、微生物等组织提供生存、生长的条件。培养基质量会直接影响到微生物实验室检验的结果，因此控制培养基质量显得尤为重要。木文主要介绍了微生物检测中培养基质量的控制方法以及基木控制要求。【关键词】培养基；微生物检测；质量控制方法【中图分类号】R888.4【文献标识码】A【文章编号】1276-7808(2015)-07-348-01近年来随着牛.物科学技术的不断发展，培养基在微生物检测以及微

2、生物实验中的应用越来越广泛，不断涌现了很多培养基生产厂商。但是，目前市场上的培养基制作工艺以及生产质量参差不齐，很多并没有达到规范化标准，质量上有待进一步提高。在微生物检测中，培养基是必需的一种试剂，培养基的质量高低，配制方法、保存方法、使用方式是否得当，都有可能会影响微生物检测的质量，因此非常有必要掌握培养基质量控制方法及要求。1.关于培养基的理化指标及其质量控制办法培养基的理化指标主要括硬度、澄清度以及PH值三项。①硬度。必须达到微生物检测要求的硬度。②澄清度。如果是固体培养基，要求没有沉淀或者絮状物质。如果是液体培养基

3、，要求液体是澄清的。③PH值。由于目标微生物不同，需要的PH值也会有所差异，因此一定要注意控制好培养基的PH值,如果温度是20-26°C的情况下，可以釆用lmol/L盐酸溶液或者氢氧化钠溶液进行调节，均要求无菌状态。而且误差应该控制在±0.2。2.关于培养基的生物学指标及其质量控制办法2.1分离培养基分离培养基的质量判断方法，主要需要观察B标菌的生长状况，冋吋需要注意是杏出现显著的生化反应区别，菌落特征是否明显，其次需要观察0标菌是否会对其他非目标菌的生长具有抑制作用。具体方法是在2块普通营养琼脂平板上以及2块

4、分离培养基平板上分别涂上0.1ml浓度为104、105、106的10倍稀释质控0标菌悬液，放置在37°C环境下连续培养17-25h。对比分离培养基平板以及普通营养琼脂平板，仔细观察两者的质控菌的颜色及其生长状况，还需要观察菌落大小及其数量等情况是否存在区别。下面列举出几种主要的分离培养基的质控菌株的标准，并且介绍了培养基质控的指标。①普通琼脂。可以选择表皮葡萄菌球、人肠埃希菌作为标准菌株，其中表皮葡萄菌球的颜色以及菌落应该生长得很好；大肠埃希菌应该生长良好。②4号琼脂。可以选择大肠埃希菌、霍乱弧菌作为标准菌株，其中大肠埃希菌

5、不生长，而霍乱弧菌应该是灰褐色，而II菌落中心应该是黑色的。③沙氏琼脂。可以选择酵母菌、大肠埃希菌作为标准菌株。苏中酵母菌位该生长情况良好，而大肠埃希菌不生长。④TCBS琼脂。可以选择人肠埃希菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌等作为标准菌株，其中人肠埃希菌的培养基不会变色，菌落比较小，而且也比较少；副溶血性弧菌的培养基会变成黄色，菌落是黄褐色的，而且整体菌落比较圆整；霍乱弧菌的培养基颜色会变成黄色，菌落是黄褐色的，而II整体菌落比较圆整。2.2选择性培养基2.2.1接种0标菌选择性增菌培养基的灵敏度主要是通过测定增菌效果来判断。在普

6、通的肉汤培养基中接种质控目标菌种，然后将其放置在37°C的温度下连续培养17-25h,严格遵循无菌操作原则采用10倍稀释生理盐水溶液将整个肉汤培养物稀释到101-109左右。然后在1支增菌培养基中分别加入0.1ml浓度为109、108、107、106、105、104、103、102、101的10倍稀释质控S标菌悬液，而iL应该在2块0.1ml涂布平板上放置104、105的10倍稀释质控B标菌悬液,并II将其放置在37°C的温度下连续培养17-25h，统计菌落的数0,并II根据统计结果合理推算出108、107、106的0.1m

7、l中的菌落数量。在没奋稀释过的0.1ml肉汤培养液中放置质控干扰菌，分别放置在0.1ml增菌培养基中，放置在37°C温度下进行培养，然后划相应的平板。2.2.2观察结果并记录全部都是0标菌，属于纯培养的话应该是（++++）;表示B标菌生长状况相对比较好的话是（+++）;1/2干扰菌、1/20标菌的话应该是（++）;0标菌大概占到20%左右，相对较少的话应该是（+）o2.2.3判断增菌效果增菌效果良好：假如1070标菌或者1060标菌基本上属于纯培养或者0标菌的生长情况比较好的情况下，而且根据菌落统计结果推算出艽相应的稀释液0

8、.1ml接种0标菌只有1个。增菌效果良好:0.1ml接种0标菌数量为10个。增菌效果相对较差：0.1ml接种目标菌数量为100个其至超过100个以上。2.3生化鉴定培养基配制生化培养基后，一定要接种具奋代表性、典型性的阴性或者阳性质控菌株进行规定吋间的培养，同吋还应该密切观察质控菌是不是达