食品卫生微生物检测用培养基质量控制探讨.doc

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1、食品卫生微生物检测用培养基质量控制探讨【摘要】培养基质量是微生物检测工作的基础，直接决定检测结果的准确性、可靠性。结合实验室实际情况，明确了培养基的购置、贮存、制备、性能测试等过程的质量控制措施，以确保培养基质量满足检测要求。【关键词】培养基质量控制微生物检测食品微生物检测是不同食品标准规定的食品必检项目之一，是按照一定的检测程序和质量控制措施，确定单位样品中某种或某类微生物的数量或存在状况。而培养基质量是微牛物检测工作的基础，直接决定检测结果的准确性、可靠性。由于食品微生物培养基品种较多，目前大约有数

2、千种不同的培养基，有液态、半固体、固体几种形式。而培养基质量控制国内可以参考的资料不多，国外的起点较高，又不适宜我国国情，依据GB/T27405《实验室质量控制规范食品微生物检测》(1),结合实验室实际情况，明确了培养基的购置、贮存、制备、性能测试等过程的质量控制措施，以确保培养基质量满足检测要求。1培养基的采购、验收和储存培养基的采购应从合格供应商中选择厂商釆购，每批培养基需供应商提供批号和相对应的质检报告。购买的培养基到货后，由药品管理员和微牛物检测人员共同核对牛产企业提供的资料、培养基名称、规格数

3、量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。验收合格后，交由检测人员接受保管，并在每瓶培养基上加贴信息标签。根据不同的培养基的特性，妥善保存。干粉培养基应保存在阴凉干燥处，要避免阳光直射；开瓶后的干粉培养基易吸湿，应注意防潮，并确保在有效期内用完。需低温保存的培养基应存放在相应温度的低温柜中。2培养基的配制2.1自制培养基自制培养皋，要严格按照所检样品检测方法标准要求的配方进行准确称量配制、称量时各种不同组分，要用专用的角匙，避免交叉污染；干粉培养基易吸潮，如房间环境湿度较大时，应提高称量速度，完毕后及时盖

4、紧瓶盖。制备培养基的水卩H值在5.5-7.5之间，应使用电阻率不小于30力Qcm的蒸憾水，最好不使用离子交换器生产的去离子水。严格控制配制过程中灭菌的温度、时间，配制完成后应检查PI1值，观察其颜色、透明度、杂质、凝胶稳定性等。2.2成品培养基随着市场经济的发展，成品微生物培养基使用越来越多，成品培养基的特点就是方便、快捷、但成品较高。需要注意的是不同厂家，或同一厂家不同批号的相同培养皋不能混用。2.3培养基溶解注意事项（1）加热溶解时不能用使用铜或铁锅，防止金属离子混入培养基中,影响微生物的生长［1］

5、；（2）溶解培养基容器的大小需大于溶解后培养基总体积的2倍以上,避免在加热溶解过程中，培养基受热，体积膨胀溢出；（3）含有琼脂类的培养基，在加热溶解前可浸泡数分钟，加热时一定耍进行搅拌，以防琼脂粘在容器底部；对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，反复冻容最多只能两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去；（4）为避免烧焦和沸腾溢出，量少的培养基最好使用水浴进行加热;（5）烧糊的培养基营养物质被破坏，并可产生有毒物质，如发现焦化，或未溶解均匀前培养皋有溢出，该培养基即不能使用，应重新

6、制备。2.4培养基的灭菌（1）常用培养基一般采用高压蒸汽湿热灭菌，通常是121°C15min,含糖或特殊培养基，按照国家标准或生产商提供的说明灭菌。有些菌种代谢周期较短，已配制好的培养基必须在15分钟内灭菌，可避免微生物生长繁殖而消耗养分，改变培养基的酸碱度。为避免高温破坏培养基的营养成分，降低琼脂的凝胶强度，必须严格控制灭菌温度和时间，不可重复灭菌。（2）部分培养基（如嗜盐琼脂培养基、胆硫乳培养基等）只能煮沸灭菌。（3）对热敏感的培养基或添加物质，应采用膜过滤方法进行过滤灭菌。（4）即用型不需灭菌，应

7、参见相关标准或培养基使用说明书，直接使用。（5）常规应用指示剂监测灭菌过程；可用生物指示剂如嗜热脂肪芽抱杆菌监测杀伤芽抱的效果。（6）灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，不能长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。并应加贴标识，标注：名称、配置日期、成分、pH值等信息。3培养基质量控制方法3.1理化试验方法2.1.1培养基物理性检测[2]外包装密封性应完好，无泄漏等现象；颜色一般为浅色，状态应为干燥粉末，无吸潮结块现象；成品培养基应防止过分失水，还应注意成品培养基如平皿裂

8、纹、充碟不均、溶血（血平板）、冷冻、过多的汽包和斑点、污染，表面凹凸不平等现象，如有上诉缺陷，应做好相应记录，并及时通知供应商，查明原因并加以纠正。2.1.2PII值的测定灭菌前后都应测定其PH值，看是否满足标准要求和灭菌前后PH值的变化差异是否止常，成品培养基是否符合标签要求。注意测量时尽量使培养基温度控制在20°C-25°Co2.1.3凝胶强度的测定凝胶强度表明培养皋中琼脂凝固的程度。可用凝胶强度测定仪测试。灭菌条件，特别是PH值会影响