【精品】培养基制备的质量控制.doc

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1、受控号：2009-12-026第I版第0次修改培养基制备的质量控制共5页第1页1.目的微生物实验室主要工作是对各种微生物进行保存、复苏、培养、检测和（或）计数，所用的培养基应对样品和被测微生物都具有特异性，为了满足微生物分析过程对培养基最低要求，和保证能够获得重现性结果，确保分析结果准确、可靠，必须対培养基的制备过程进行有效的监控，从而保证结果的可信和有效。2.适用范围微生物实验室所有培养基的接收、贮存和制备过程。3.职责培养基管理人员：收到培养基后按要求对培养基进行接收、记录和贮存。培养基制备人员：培养基的制备幣个过程应严格按要求进行。科室负责人：负责对培养基

2、的订购和综合管理。4.培养基的接收与贮存4.1生产企业应提供的文件4.1.1培养基的独立成份、添加成分及产殆编号及批号。4.1.2培养基使用前的PH,储存信息和有效期。4.1.3性能评价和所用的测试菌株，技术数据清单，质控证书，必要的安全/危险数据。4.2实验室检査记录实验室收到培养基后应检杳：培养基名称和批号，接收口期，有效期，包装及其完整性。4.3贮存应严格按照供应商提供的贮存条件，有效期和使用方法进行培养英的保存和使用。培养基的购买应有计划，以利于存货的周转（即掌握先购先用的原则）。4.3.1脱水培养基及其添加成分：新购买的培养基一般为脱水的粉状或颗粒状，

3、保存在密闭的容器中。用于菌种选择或鉴定的添加成分通常为冻干物或液休。实验室保存有效的培养基目录淸单应包括的内容有：容器密闭性复杳、首次开封日期、内容物的感官检杏（如粉末流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等）。4.3.2商晶化R卩用型培养基：应严格按照供应商提供的贮存条件、有效期和使用方法进行保存和使用。4.3.3商品化的脱水合成培养基和各别成分制备的培养基：这类培养基的贮存有效期各不相同，--般无法做到统一规定。可参照不同标准中的规定执行。培养基灭菌分装到平皿、试管或测试瓶中，不能立即使用的培养基应避光、干燥保存。除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如使

4、用前入添加成分的培养基）应在4°C受控号：2009-12-026第I版第0次修改培养基制备的质量控制共5页第2页冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20°C）下保存不超过1个月，以保证其成分不改变;不稳沱选収择性物质和其它添加成分应即恥即用；对发生化学反应或含有不稳泄成分的固体培养基也应即陀即用，不可二次融化。观察培养基颜色变化，是否有蒸发、脱水情况，是否有微生物生长。当培养基发生这类变化时，应禁止使用。使用和进一步加热前，应事先将培养基放置到室温。1.培养基的实验室制备5.1概述使用脱水培养基和其他含有有害物质（胆盐或英它选择剂）的成分时，应遵守良好实验室规范和

5、生产厂商提供的使用说明恥制，如质最/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤，并做好记录。5.2水配制培养基使用蒸水或相同质量的水，以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸绸水的用氯消毒的水制备的，在蒸谓前应先对氯进行中和（见GB/T6682）o盛放蒸倦水的容器最好是山中性材料制成的（如中性玻璃、聚乙烯等）。为保证蒸绸水的质彊，电导率应VI0ms/m（V100As/cm）,细菌数V50CFU/mL,建议每月至少检测一次。警告：采用离子交换器（去离子）生产的去离子水，微生物含量较高，这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要

6、使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸帑水。5.3称量和复水称量所需的脱水培养基（注意缓慢操作，必要时佩带口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有毒物质的培养基粉末），先加入少量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后再加入至所需的量。5.4溶解脱水培养基加水后适当加热，并不停搅拌使其快速溶解，必耍时，重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟，用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中，并充分溶解，然后再加入到所需的量。5.5pH的测定和调整用pHil-测pH,必要吋进行调整。在实验室用各别成分制备培养基，除特殊说明外，培养基灭菌后冷却到25°C吋，p

7、H的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L（约lmol/L）的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L（约1叱1几）的盐酸溶液调幣培养基的pH,注：商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大，但采用优质蒸饰水或去离子水配配制时，灭菌前无需调节pH值。受控号：2009-12-026第I版第0次修改培养基制备的质量控制共5页第3页5.6分装将制配制好的培养基分装到适当的容器中，根据不同用途，容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。5.7灭菌培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。壳绿培养基等特定的培养基中含有对■光和热敏感的物质，只能煮沸灭菌，煮沸后应迅速冷却

8、，避光保存；明胶、血淸、