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1、动物科学与动物医学2003年2月第20卷第2期(总第92期)23DNA的大小约为289.32kb。EcoRⅠ酶切片段大小3卢圣栋主编.现代分子生物学实验技术[M].第二版,北集中在3.4～22.4kb之间,在22.3kb以上有大分京:中国协和医科大学出版社,1999:61～704HydeJ.M.etal.1967Molecularweightdetermination子量片段拖尾痕迹,电泳条件、凝胶浓度和各个片段ofpowlpoxvirusDNAbyelectronmicroscopyVirology发生重叠可能是其片段之和产生差异的主要原因。33:112～120这有待于进一
2、步进行其他限制性内切酶酶切和双酶5CalnekB.W.etal.1997DiseasesofPoultryTenthedi-切处理研究。tionIowastateuniversitypress参考文献6GaffordL.G.etal.1978SedimentationcharacteristicsandmolecularweightsofthreepoxvirusDNAs.Virolo-1殷震,刘景华编.动物病毒学[M].第二版,北京:科学出gy89:229～239版社.1997,204～2477CouperB.E.etal.1990Restrictionendonuclea
3、semap-2Magar,H.etal.1989Comparisonofmethodsforcon-pingofthefowlpoxvirusgenome.Virology179:159～centrationandpurificationofbovineviraldiarrheavirus.167J.Virol.Methods,16(4):271～279RestrictionEndonucleaseAnalysisofthePigeonPoxvirusDNA121Zhengwenjie,Liuwei,Zhaoxiangping(1.TianjinEntry-ExitInspe
4、ctionandQuarantineBureau,Tianjin300201;2.TianjinLaboratoryAnimalCenter,Tianjin300381)Abstract:ThePigeonpoxviruswerepurifiedbythemethodsofsucrosedensitygradientcentrifugation,thehighmolecularweightDNAoftheviruswereextractedbytheprotocolofproteinaseK.UsingtherestrictionendonucleaseofEcoRI、Sal
5、IandPstItodigesttheextractedvirusDNA,weget17,8and13DNAfragments,respectively.Thededucedlengthofthepoxviurswasabout289.32kb.Keyword:Pigeonpoxvirus,DNA,Restrictionendonucleaseanalysis(收稿日期:2003-01-10)VSV的RT-PCR快速检测方法的建立12杨桂梅,徐自忠(1.云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201,2.云南出入境检验检疫局,云南昆明650228)摘要:选取水泡性口炎病毒
6、N基因序列,设计1对引物,建立检测水泡性口炎病毒的RT-PCR方法。对VSV各毒株进行检测,结果均为阳性,而对反刍动物病毒性疾病相关病毒进行检测,结果均为阴性。结果表明所建立的RT-PCR技术可用于水泡性口炎的诊断和流行病学调查。关键词:水泡性口炎病毒;RT-PCR;核酸检测中图分类号:S852.65+9.5文献标识码:A文章编号:1008-9381(2003)02-0023-03水泡性口炎(Vesicularstomatitis,VS)是由弹型(NJ)和印地安那型(IND)两个血清型。其临床症状病毒科水泡病毒属的水泡性口炎病毒(Vesicular状与口蹄疫(FMD)、猪水泡
7、病(SVD)和水泡疹stomatitisVirus,VSV)引起的牛、马、猪和鹿等多(VE)很相似,不易区分。VS感染猪和乳牛后,引起[1]种动物的一种病毒性传染病。该病毒分为新泽西生产能力下降而造成严重的经济损失。国际兽医局24AnimalScience&VeterinaryMedicineVol.20No.2(TotalNo.92)(OIE)将该病列为动物A类传染病。1.7RT-PCR检测VSV特异性的测定应用所VSV基因组为线状不分节段的单股负链建立的RT-PCR方法检测VSV-NJ,VSV-IN
