N_离子注入对三孢布拉氏霉菌抗氧化酶活性的影响

《N_离子注入对三孢布拉氏霉菌抗氧化酶活性的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第26卷第2期辐射研究与辐射工艺学报Vol.26,No.22008年4月J.Radiat.Res.Radiat.Process.April2008+N离子注入对三孢布拉氏霉菌抗氧化酶活性的影响张宁虞龙（南京工业大学制药与生命科学学院南京210009）+摘要本文研究了N离子注入对三孢布拉氏霉菌（Blakesleatrispora(−)）细胞内过氧化氢酶（Catalase,CAT）、过氧化物酶（Peroxidase,POD）、超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase,SOD）活力的影响，以及对菌体清除–•超氧阴离子自由基O2、羟基自由基·OH能力和菌体总抗氧化能力（TotalAnti

2、oxidativecapacity,T-AOC）的影+响。结果表明，B.trispora(−)经N离子注入后CAT酶的活性均低于对照水平，POD和SOD酶的活性以及清–•+15除O2和·OH的能力随着注入剂量的增加呈现先减后增的变化趋势，而菌体总抗氧化能力在N注量为6.0×10-2+16-2cm处降到最低，随后逐渐增加，在N注量为1.2×10cm处增至最大后逐渐下降。由此推测，离子注入B.trispora(−)所诱导的总抗氧化能力的变化是导致B.trispora(−)注量-存活率曲线呈现“马鞍型”变化趋势的原因之一。关键词三孢布拉氏霉菌，氮离子注入，抗氧化酶，β-胡萝卜素中图分类号TQ922.

3、9，Q933，TS261.15β-胡萝卜素是一种优良的色素，在人体和动物[5，6]1.2低能离子注入与样品处理体内可以转化为维生素A，同时还有较强的抗氧化功能，因此兼有较高的营养价值和药用价值。目前三孢布拉氏霉菌（Blakesleatrispora(−)）经固[1,2]广泛应用于食品、药品、化妆品和保健行业。β-体培养基活化后，孢子成熟，用无菌水洗下新鲜孢胡萝卜素的生产方法有植物提取法、盐藻法和微生子，振荡，使孢子充分分散，制成一定浓度的孢子物发酵法。从品质、技术、生产、资源成本等角度悬浮液。取0.1mL孢子悬浮液均匀涂布于无菌培养分析，利用三孢布拉氏霉（Blakesleatrispora）发

4、酵皿上，以无菌风吹至干燥后进行离子注入。注入能[3,4]15生产β-胡萝卜素是比较理想的产业化生产方法。量为10keV，注入量为0（对照）、3.0×10、+1515161616-2本文研究N离子注入三孢布拉氏霉后菌体存活率6.0×10、9.0×10、1.2×10、1.5×10、1.8×10cm。-3及体内抗氧化酶（包括CAT酶、POD酶、SOD酶）靶室真空度为10Pa，以5s脉冲式注入，间隔15s。活性影响，以及对菌体总抗氧化能力T-AOC、清除离子注入后，取出平皿，用0.5mL无菌水洗脱，涂–•O2和·OH能力产生的变化，探讨这些抗氧化酶在布到固体培养基上，28℃培养箱中培养至长出单菌+菌体

5、抵抗离子注入伤害过程中的作用，为研究N落，然后挑取单菌落再继续培养48h用于酶的提取离子束的诱导特点和作用机理以及进一步筛选β-胡和活性测定。萝卜素高产菌株提供实验依据。取上述培养好的菌体约0.25~0.3g，加入适量的石英砂（20~40目）和约1.5mL0℃的蒸馏水置1材料与方法于样品管中，用Mini-BeadBeater珠磨式组织研磨器处理3min。研磨结束后，将菌液于4℃，3000r/min1.1菌种及培养条件离心10min，吸取上清液冷藏备用。三孢布拉氏霉菌（Blakesleatrispora(−)），本实验室筛选保藏。该菌生长的固体培养基为玉米粉1.3酶活性的测定30g、麦芽浸粉10

6、g、琼脂粉15g，蒸馏水1000mL、利用过氧化物酶（POD）催化过氧化氢反应的最佳培养温度28℃、最适pH＝6.2~6.4。原理，通过测定420nm处吸光度的变化测得POD酶活。过氧化氢酶（CAT）测定采用钼酸氨法，超——————————————第一作者：张宁，女，1978年7月出生，2005年于南京工业大学获硕士学位，目前为该校工业生物催化专业在读博士研究生通讯联系人：虞龙收稿日期：初稿2007-10-10，修回2007-12-0790辐射研究与辐射工艺学报第26卷+氧化物歧化酶（SOD）测定采用单胺氧化法，总抗2.3N离子注入对B.trispora(−)SOD酶活性的影3+氧化能力（T-

7、AOC）测定采用Fe还原法，通过模响拟黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统测定清除超氧阴–•从图3可以看出，B.trispo(−)中总SOD酶活性离子自由基O2的能力，利用Fenton反应测定清除随着注入剂量的增加呈现先降低后增加的变化趋羟自由基·OH能力。以上酶活的测定均采用南京建势，而菌体中CuZn-SOD酶的活性则随着注入量的成生物工程研究所生产的试剂盒，检测原理及操作增加呈现先下降后上升再下降的变