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《冬小麦原生质体培养胚状体直接发生》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、!"卷#期生物工程学报’()*!"+(*#$%%%年&月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12,-./-01-2$%%%!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!冬小麦原生质体培养的胚状体直接发生葛台明（湖北民族学院园艺系恩施66#%%%）章荣德秦发兰余毓君谢岳峰（华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉65%%4%）摘要冬小麦品种“京花一号”胚性愈伤组织在改良的+培养基（+78培养基）上继代得到易碎型胚性愈伤组"织，转入改良9,液体培养基（9,8:培养
2、基）后得到胚性悬浮系，分离的原生质体在改良的9,培养基（9,8;培养基）上培养，再生细胞直接产生体细胞胚胎，并再生出完整植株。体细胞胚胎形成过程与小麦合子胚的形成过程十分相似。关键词冬小麦，京花一号，原生质体培养，体细胞胚胎直接发生，植株再生中图分类号<=!5文献标识码>文章编号!%%%35%"!3（$%%%）%#3%"%&3%#原生质体培养是利用遗传操作改良作物的基于含$%0:9,8:液体培养基的!%%0:无菌三角础。自!&==年?@22AB等［!］利用小麦推广品种烧瓶中，在摇床上进行悬浮培养；植株分化采用“CD2AB”花药培养的胚性愈伤组织建立胚性悬浮系
3、，+78I转9,85的方法进行。分离原生质体培养获得再生植株以来，小麦的原生!"$原生质体的分离与培养质体培养研究已取得了巨大的成功，总计十多个小酶液的组成见表!。%E6#过滤除菌。原生"0麦品种（系）的原生质体培养已获得了再生植株［$］。质体分离、培养、植株分化及培养基同文献［#］。然而，大多数报道均是由再生细胞产生愈伤组织，再表!酶液组成通过愈伤组织的体细胞胚胎发生方式产生再生植株。由原生质体再生细胞直接产生体细胞胚并萌发%&’()!*+,-+./0/+1+2)134,).+(50/+1.出再生植株的报道还不多［5］。本文报道了典型冬C(0.(BA/A(
4、JKJLM0-B()N/A(J!KJLM0-B()N/A(J$小麦“京花一号”胚性悬浮系分离原生质体培养直接C-))N)@B-(J(LNO@IP!%!Q%*#Q形成体细胞胚和植株再生的结果。C-))N)@B-(J(LNO@I,%%*#Q;-F/AJ@B-B-2R@!Q!Q!材料与方法;-F/()M@B-S$5%*%$#Q%*!QP!P!!"!供试材料与胚性愈伤组织的诱导9@JJA/()%*#0()·:%*#0()·:本研究所用小麦材料京花一号由中国科学院遗C@C)$·$?$T!%00()·:P!!%00()·:P!传研究所欧阳俊闻研究员提供。取处于雌雄蕊分化
5、U?$;T6%*400()·:P!%*400()·:P!与形成期的%E#!!E%F0的幼穗，切成%E5F0左右9K,5*%00()·:P!5*%00()·:P!的切段接种于9,8培养基上，!个月后将愈伤组织.?#*4V%*%##*4V%*%#转移至+78培养基上继代培养，并注意筛选易碎型、生长迅速、表面湿润、呈细颗粒状的胚性愈伤组#实验结果与分析织（GG型胚性愈伤组织）用于建立胚性悬浮系。培养基、培养方法和条件见文献［6］。#"!愈伤组织的诱导、悬浮培养及悬浮系的分化!"#悬浮系的建立、继代和分化共计培养了5%"个幼穗切段，愈伤组织的诱导按文献［6］的方法，
6、取胚性愈伤组织!!$H，置率分别为!%%Q。愈伤组织在+78培养基上易于收稿日期：!&&&3!!3!4，修回日期：$%%%3%43%5。基金项目：华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室开放项目资助，湖北省教委青年项目提供了部分资助。生物工程学报$D卷D$C形成易碎型胚性愈伤组织。幼穗愈伤组织经!个月呈圆形，细胞壁薄，胞质浓，液泡无或不发达，基本上的继代培养和筛选，得到了"块易碎型胚性愈伤组看不到长形的厚壁细胞；静置片刻后，培养物能很快织，分别编号为#$至#"。沉于瓶底，颜色淡黄、鲜艳，上清液透明，瓶壁上基本易碎型胚性愈伤组织转入%&’(培养基后能没有附着物。
7、共得到小麦胚性悬浮系,个，分别与很快分散，经)!"周液体培养就能形成稳定的悬浮易碎型胚性愈伤组织相对应。培养物。培养物由数十至数百个细胞的细胞团组成检测了#$和#)两个胚性悬浮系的植株分化，结（图版*+$），无或基本上无较大的愈伤组织块；细胞果见表)。可见#)悬浮系具较高的植株再生能力。表!小麦胚性悬浮系的植株分化"#$%&!’%#()*&+&(&*#),-(-./0&#)1213&(1,-(42%)2*&14353678992:;81.60;;0<43536;0=010+?8:036/981:4353678992319A?8:036;33:&-./01.2
8、31.:3;0=010;8:231>0<2->;8:
