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1、2009年第6期中国酿造专论与综述总第207期1乳酸菌分类鉴定方法的研究进展1121*庞会利,谈重芳,蔡义民,秦广雍(1郑州大学离子束生物工程省重点实验室,河南郑州450052;2日本国立畜产草地研究所,日本枥木县3292793)摘要:对目前使用的乳酸菌表型特征鉴定和基因型特征鉴定方法的优缺点进行了综述。依据表型的常规生理生化特征进行乳酸菌的分类鉴定不仅费时,有时甚至难以完成。随着分子生物技术的发展和基因数据库的建立,将分子标记技术、新兴鉴定技术与常规方法结合使用,将使乳酸菌的分类、鉴定更为准确和便捷。关键词:乳酸菌;食品;酿
2、造;鉴定中图分类号:TS2013文献标识码:A文章编号:0254-5071(2009)06-0001-04Progressinresearchonlacticacidbacteriaidentificationmethods1121*PANGHuili,TANZhongfang,CAIYmiin,QINGuangyong(1.ProvincialKeyLaboratoryofIonBeamBioengineering,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China;2.NationalInsti
3、tuteofLivestockandGrasslandofJapan,Tochigi3292793,Japan)Abstract:ThispaperprovidesanoverviewofphenotypicandgenotypetechniquesthatarecurrentlyusedforidentificationofLAB,andthemeritandshortcomingofallkindsofmethodsaresummerized.Theconventionalphenotypesbasedonthephysiologicala
4、ndbiochemicalcharacteristicsoflacticacidbacteriaidentificationnotonlytmieconsumingbutalsosometmiesdifficulttoworkou.tWiththedevelopmentofmoleculartechniquesandgeneticdatabase,usingacombinationofmolecularmarkers,emergingidentificationtechnologiesandconventionalmethodswillenab
5、letheclassificationandidentificationoflacticacidbacteriamoreaccurateandconvenien.tKeywords:lacticacidbacteria;food;brewing;identification乳酸菌是利用可发酵糖产生大量乳酸的革兰氏阳性用API50CHL体系分析了317株可能为乳酸菌的菌株,只[4]细菌的通称。乳酸菌是广义范畴的概念,是非正式、非规有38%分离株被鉴定到种的水平。WIJTZEST等利用[1]范的细菌分类学名称。当前,乳酸菌产品以其独特的生2种碳
6、源发酵测试体系也未能将14种乳酸菌分离株鉴定物学功能呈现出前所未有的商业开发利用价值,乳酸菌在到种的水平。酿造工业中有广泛的应用,如在白酒固态发酵酿造中,虽然应用表型性状鉴定对部分乳酸菌是非常有用的,乳酸菌产生的乳酸可以与乙醇酯化生成乳酸乙酯,对于但对某些乳酸菌来说,即使表型性状很相似,也不意味[5]白酒的风味十分重要,用于葡萄酒及苹果酒酿造中的乳着基因型亲源关系很近。酸菌可以触发苹果酸、乳酸发酵等。所以优良菌株的筛2DNA标记技术选、生产菌种的保护越来越引起商家的重视。传统的表型、生物化学方法鉴定微生物耗时耗力,培1经典方法(表型特征鉴定)养条
7、件的改变还可能导致结果发生改变,鉴定结果很不稳人类对乳酸菌的分类鉴定和利用已经有悠久的历史,定。因此,人们希望能找到一种快速、稳定、灵敏的方法用并积累了丰富的经验和知识,形成了至今一直沿用的传统于微生物的分类研究。从分子和基因水平来认识乳酸菌分类鉴定方法,包括形态特征、生理生化反应及血清学反的遗传结构、组成和分类,许多新的分子标记技术被用来应等,这些方法都是基于微生物表面受体的特异性,属于进行乳酸菌的分类和鉴定,如16SrDNA、16S~23SrRNA表型分类法。基因间隔区(IntergenicSpacerRegion,ISR)的序列分析和一般情
8、况下,表型鉴定是一种比较廉价的方法。基于PCR技术的分子标记技术等,其中基于PCR技术的[2]GONZLEZCJ等利用44种形态学和生理