乳酸菌鉴定方法在食品工业中的应用及研究进展

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1、食品工业科技综述ScienceandTechnologyofFoodIndustry乳酸菌鉴定方法在食品工业中的应用及研究进展段宇珩,谈重芳,王雁萍,秦广雍,霍裕平(郑州大学物理工程学院离子束生物工程省重点实验室,河南郑州450052)RFLP、AFLP、DGGE、TGGE、DNA-DNA杂交、DNA-摘要:乳酸菌是食品发酵工业中一类重要的菌种,准确快速的乳酸菌分类鉴定是十分必要的。本文对目前使用的乳酸菌RNA杂交、rep-PCR、16SrRNA序列测定以及与PCR表型特征鉴定和基因型特征鉴定乳酸菌方法及各种方法相结合的核酸探针杂交技术等基因型和系统发育特的优缺点进行了综述。关键词:乳

2、酸菌,食品,鉴定征用于乳酸菌的分类鉴定。Abstract:Lacticacidbacteria(LAB)isoneofthemost1表型特征鉴定importantgroupsofbacteriatothefood在食品工业和应用研究中,表型性状测定仍然fermentativeindustry.ThecorrectspeciesidentificationofLABisveryimportant.Thispaper是乳酸菌鉴定的重要依据,包括形态学和生理学特providesanoverviewofphenotypicandgenotypic征的测定,主要依据细菌的菌落特征、菌体形态、生

3、techniquesthatarecurrentlyusedforidentificationofLAB,andthemeritandshortcomingofallkinds理生化特性和代谢产物等。在乳酸菌的工业应用中,ofmethodsaredescribed..并不需要把所有的乳酸菌都鉴定到种的水平,乳酸Keywords:lacticacidbacteria(LAB);food;identification菌的分类要根据实践需要、工作量的大小、时间以及中图分类号:TS252.1文献标识码:A成本来衡量分类到何种水平。一般情况下,表型鉴定文章编号:1002-0306(2007)02

4、-0242-03是一种比较廉价的方法,Gonzalez等[2]利用44种形态学和生理学特征对淡水鱼及其生活环境中分离到乳酸菌是一类革兰氏阳性、利用可发酵糖产生的249株乳酸菌进行鉴定,其中90%以上的分离株大量乳酸的细菌的通称。乳酸菌是广义范畴的概念,被鉴定到属的水平。目前已经有一些比较受欢迎的是非正式、非规范的细菌分类学名称[1]。乳酸菌广泛微生物鉴定体系,如API、BIOLOG和API50CHL等应用于微生物的鉴定。Corsetti等[3]利用API50CHL地存在于自然界、动植物体、乳制品和发酵食品中,且大多数为非致病菌,属于有益微生物,是人体正常体系分析了317株可能为乳酸菌的

5、菌株,只有38%分离株被鉴定到种的水平。Wijtzes等[4]利用两种碳源菌群。人们在生产和应用中要利用乳酸菌,需要了解它们的生物学特性,因此对乳酸菌进行快速、可靠的发酵测试体系也未能将14种乳酸菌分离株鉴定到分类和鉴定在微生物学和食品科学的研究中是必需种的水平。这些研究说明由于表型法鉴定重复性较的。在乳酸菌分类鉴定方面,如以形态学、生理生化差和分辨率较低,因而有一定的限制性,一般只能鉴和化学特征等表型特征为主要指标,则可能由于乳定到属的水平。酸菌形态多样,且易受培养条件的影响,加之生理生相比而言,利用SDS–PAGE分析乳酸菌的整个化特征极其相似,很难对乳酸菌相近种属做出正确细胞的蛋

6、白质是一种更加值得信赖的鉴定方法。Leisner[5]利用蛋白质谱成功的将从马来群岛调味鉴定,在相同种属不同菌株的鉴定方面更是非常困等难。随着分子生物学的发展,包括G+Cmol%测定、品中分离到的64株乳酸菌鉴定到种的水平。Temmerman[6]利用该方法将355株乳酸菌鉴定到等种的水平。这种方法的分类学可靠性和重复性大大收稿日期:2006-05-11作者简介:段宇珩(1980-),男,博士研究生,主要从事蔬菜和乳制品提高,缺点是工作量很大。此外,该方法在嗜酸乳杆中乳酸菌的分类鉴定及应用研究。菌的一些亚种和植物乳杆菌的一些亚种鉴定时,分基金项目:国家“十五”科技攻关项目资助课题(20

7、01BA302B-03)。2422007年第02期食品工业科技综述Vol.28,No.02,2007辨能力较差。扩增,再将扩增产物在TGGE/DGGE胶上分离并解析其他表型分类的方法,包括薄层层析法分析有该类群中的细菌组成,能够提供有关群体变化和差机酸以及脂肪酸甲酯等,但这些方法成功率比较低。异的信息。DGGE/TGGE带谱中每条带可能代表一为了得到较好的乳酸菌分类结果,经常利用多种表个不同的微生物物种,电泳带谱中条带的数量反映环型方法共同鉴定

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