对甲基苯甲酸连接的氯霉素全抗原合成与鉴定_罗舜菁

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1、111，*2111罗舜菁，陈婷婷，刘成梅，邹常春，严杰琳，陈臣，高鹏(1.南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌330047;2.南昌大学，江西南昌330031)摘要:以对氯甲基苯甲酸(CBA)或对氯甲基苯甲酸甲酯(MCB)分别与氯霉素(CAP)反应合成氯霉素－对甲基苯甲酸半抗原(CAP－MBAⅠ、CAP－MBAⅡ)，再与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备全抗原;通过紫外、荧光光谱扫描定性鉴定合成成功;bradford法结合TNBS法定量计算出全抗原表面半抗原密度(HD)。再将CAP－MBAⅡ与卵清蛋白(OVA)合成包被抗原(CAP－MBAⅡ－OVA)，间接竞争ELISA计算其抑

2、制率。研究结果表明，半抗原全抗原偶联效率优于CAP－MBAⅠ，MCB与CAP反应合成的半抗原CAP－MBAⅡ更适合蛋白偶联。采用CAP－MBAⅡ－OVA作为包被抗原可以提高ELISA检测的抑制率从而增加其灵敏度。关键词:氯霉素，对甲基苯甲酸，连接臂，全抗原Synthesisandcharacterizationofchloramphenicolcompleteantigenlinkedby4－methylbenzoicacid111，*2LUOShun－jing，CHENTing－ting，LIUCheng－mei，ZOUChang－chun，111YANJie－lin，CHENCh

3、en，GAOPeng(1.StateKeyLaboratoryofFoodScienceandTechnology，NanchangUniversity，Nanchang330047，China;2.NanchangUniversity，Nanchang330031，China)Abstract:AnewChloramphenicol(CAP)haptenwaspreparedbyconjugateCAPwith4－(Chloromethyl)benzoicacid(CBA)orMethyl4－(chloromethyl)benzoate(MCB).Twotypesofhapten(

4、CAP－MBAⅠ，CAP－MBAⅡ)wereusedtosynthesiscompleteantigen(CA)withBSA.CAwasidentifiedbyUVandflorescencespectrum.ThehaptendensityofCAwasevaluatedbyBradfordmethodtogetherwithTNBSmethod.CAP－MBAⅡwasthenlinkedtoOVAformingSolid－coatingantigen(CAP－MBAⅡ－OVA).TheresultsshowedthatMCBconjugatedwithCAPwasbettert

5、hanCBA.CAP－MBAⅡ－OVAcanrisetheinhibitrateofELISAandsensitivitycanbeimproved.Keywords:chloramphenicol;4－methylbenzoicacid;linkingarm;completeantigen中图分类号:TS201.2文献标识码:A文章编号:1002－0306(2011)03－0200－05［1］氯霉素(chorampheulcol，CAP)及其体内代谢物逆的再生障碍性贫血，严重危害人类健康。因此，氯霉素糖醛酸残留具有血液系统毒性，可导致不可美国、欧盟等诸多国家规定禁止氯霉素用于食源性

6、［2－3］动物，并将氯霉素列为必检项目，规定不得检出。收稿日期:2010－11－10*通讯联系人［4］近年来，荧光偏振免疫分析、基于表面等离子共振作者简介:罗舜菁(1969－)，女，副教授，硕士，研究方向:食品安全。［5］的生物传感器等新兴免疫技术越来越多地运用到基金项目:江西省教育厅科学技术研究项目(GJJ09062)。檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾檾(5):13－23.surfacemethodology［J］.BiotechnolBioeng，2002，78:289－295.［5］余勃.枯草芽孢杆菌发酵豆粕生产大豆活

7、性肽的研究［8］吴晖，卓林霞，解检清，等.发酵条件对枯草芽孢杆菌发酵［D］.博士学位论文，2006:57－58.豆粕中的蛋白酶活力的影响［J］.现代食品科技，2008，24［6］EllaiahP，AdinarayanaK.Responsesurfaceoptimizationofthe(10):973－976.culturalconditionsfortheProductionofalkalineProtease［J］.Sei［9］舒丹，李宏，严建华，等.