资源描述:
《聚合酶链反应检测沙眼衣原体的进展》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华传染病杂志!∀年#月第∃卷第%期聚合酶链反应检测沙眼衣原体的进展’∃‘&吕火祥张素英许立综述刘建栋审校,()∗一产,近年研究表明沙眼衣原体∋+,−.&+5ϑΛϑ(Λϑ(5(5(5(Λ5%作为引物对,·。/0+12+/&31/0,;88(9),4除5引起眼结膜炎外在::基因进行扩增在对沙眼衣原体,,性传播性疾病的传染方面起到越来越重要的6个血清型的扩增检测中除了血清型Μ外。作用在发达国家非淋病奈瑟氏菌性尿道炎其它都得到了满意的:;:8基因片段扩增。,和脓性宫颈炎患者,产物ϑ0&ΝΝ+&,和5)&Ο2Ε等‘#,用这种819对6帕以
2、上由沙眼衣原体。,,引起此外沙眼衣原体还可引起肝周炎∃例临床样品沙眼衣原体的:;:8基因进、,‘’一%7。,,不育盆腔炎症宫外孕等对沙眼衣行扩增扩增阳性的为#例培养为例阳,,。原体的检测有经典的细胞培养法检测相应性例培养法阳性的8(9全部阳性,,≅+/01&+’!,,15Π抗原的各种酶联免疫法荧光免疫法以及&等以15和为引物扩增沙眼衣「‘一,。,基因探针的核酸杂交法等培养法虽然原体6个血清型的:;:8基因片断产生扩,,敏感特异被认为是沙眼衣原体检测的肯定增产物为一个∃Ο8的片段有时在血清型,,,Φ,标准但它受多种条件的影响且工作强
3、度?+,ΘΡ和Σ型中可产生另一产物#Ο8并。,。尸大其它几种特异抗原检测的方法虽然特以(5Ι6一5((55ϑ(ΛΛϑ(5(5ϑ((5ϑ,。,异性很高但敏感性不甚满意∋帕一#帕45ϑ一%,这一寡核昔酸为探针对扩增产物经,基因探针的核酸杂交法虽然敏感性和特异性Π2Γ/)Κ0Ε印迹后杂交沙眼衣原体每个血清,,型扩增产生的Ο8(5,都很高但基因探针通常都以同位素为标记∃都与产生阳性杂,,,,放射性危害较大且检测过程繁琐难以推交而与#Ο8无杂交反应来确定8(9扩增。,Γ+,广新近发展起来的聚合酶链反应∋8(94在:;:≅基因的特异性再通过Λ∗∗或
4、Θ8∗∗,、沙眼衣原体检测上的应用使沙眼衣原体的>(;9ΡΘ&ΕΝ∗三种限制性内切酶切割扩增、、、。,检测变得简便快速敏感特异现就检的:;:8=ΤΛ产物以检测沙眼衣原体的,。。测沙眼衣原体的8(9综述如下6个血清型这种由8(9和限制片段长度的、一沙眼衣原体主要外膜蛋白∋:;:84多形态分析∋9Κ3/0&Κ/&2ΕΝ0+Υ,ΚΕ/∗ΚΕΥ/)·≅2∗−,239ςΣ≅,特异的基因扩增检测印)&,4结合的方法在沙眼主;,要外膜蛋白∋::84分子量为衣原体的分型上与血清学法相关极好为沙∀<=+,>?4和网状体9?4在衣原体原体∋∋眼衣原体的分型增
5、加了另一种更科学的方,,。中都存在占外膜总蛋白的肠以上沙眼法衣原体的各个血清型都有:;:8的基因82∗Κ等‘’4用此法对沙眼衣原体标准株2,≅∗4,∀3ΒΑ3Β;8Α3∗Α,∋其个高变区ΑΧ分别编码编码::的区进行测序表明每个血Φ,Α,。:;:8∀个突出于膜外的结构域ΔΕΧΔ=清型都有特异的核昔酸序列在对∃6例泌。,使得:2:8具有复杂的抗原抗体系综尿生殖道感染的沙眼衣原体检测中揭示引ΕΓ/&∗)‘Η,∃%等首先用个邮个核昔酸组起这些疾病的沙眼衣原体常见的血清型为(5Β产一ϑ((Κ(555ΚΛϑ5成的寡核昔酸Ι6Ω浙江省人民医院杭州
6、邮政编码%“一%,Φ产一Ω刃(5ϑ(55((5(和(5Ι6Λ555Λ(ϑ∃浙江省桐乡市第二人民医院中华伶染病杂志!!∀年%月第∃卷第%期、、,一,Φ,一>∋%#帕4ς∋Η帕4=和ϑ∋各占∀呱4型Λ5(5(ϑϑ%和5二6ϑΛΛΛ((ΛΛ(5(,,一%‘同时发现=型易感染男性ϑ型易感染女5Λ1ϑ15ϑ两种引物扩增沙眼衣原体内。+Ε〔,,。性ΞΥ等川即对#!例来自不同地区临床源性质粒=ΤΛ产生一个特异的6ΗΟ8产物;,≅∗【,5Ψ标本中分离出来的沙眼衣原体基因进Ζ&等“在使用5和两个引物的基础上再8(9,∗8,8Ψ‘一(ΛΛϑ(
7、55ΛϑΛ5((行而后对扩增产物经ΛΝΓ或Λ∗Γ∗和加入一组引物Ι6。,一产08Φ产一:38Ρ酶切后行9ςΣ8分析结果发现沙眼ϑ555(5(%和8Ι6((5Λ5Λ(Λ5ϑϑ,一,衣原体的传播与地理环境有关不同的环境515Λϑ15ϑ1%,以两组四引物扩增沙眼衣Ω;,8Ρ,ΗΠ<Ο=ΤΛ,有不同的=ΤΛ的序列多形态建立原体特异的质粒产生两种扩增。〔‘3,,各地标准的;,8Ρ=ΤΛ序列的多形态库对研产物6ΗΟ8和∀%Ο8:+)2Ε−等先以。,ΦΦ产一究沙眼衣原体的传播很有意义<Σ一<Σ∋<Σ,65((ϑϑΛϑ(ϑΛ55Λ(、ϑΛΛϑΛ一%,Β<
8、ΣΦ尸一二质粒=ΤΛ的8(9检测Ι6ΛΛ5(ΛΛ5ϑ(((ϑϑ,沙眼衣原体含有质粒且该质粒存在于ϑΛ55ϑϑ界%勺两引物扩增沙眼衣原体质粒。整个沙眼衣原体独特的原体网状体发育产生