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《烟叶产木聚糖酶菌株的分离及鉴定》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2013,Vol.29,No.11烟叶发酵过程中产木聚糖酶菌株的分离及鉴定范一文,林美燕,李旭东,李喆,陈雅文,韩双艳(华南理工大学生物科学与工程学院,广东广州510006)摘要:本文研究了微生物对烟叶增香的作用,研究结果对烟叶发酵有着重要意的义。在研究中用于筛选的烟叶样品选自三个年份(2007年、2008年、2009年)的五个产地(毕节、楚雄、昆明、曲靖、襄县),即有15组样品。对烟叶样品依次进行微生物的富集、分离纯化实验,然后进行产木聚糖酶菌株的筛选,
2、筛选培养基经刚果红染液染色之后,以菌落周围出现透明圈作为产木聚糖酶菌株的筛选标准。然后对筛选出的73株产酶菌株采用3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)进行木聚糖酶酶活力的测定,从中选择一株产酶活性较高的菌株-Qb4号菌株,进行形态学分析实验、生理生化实验、碳源利用分析实验以及16SrRNA保守序列分析,最终将该菌鉴定为甲基营养型芽孢杆菌。将该菌应用于烟叶増香工艺流程中,是未来本课题研究的主要方向。关键词:烟叶;木聚糖酶;分离纯化;鉴定;筛选文章篇号:1673-9078(2013)11-2658-2662Screeningan
3、dIdentificationofaXylanase-producingStrainduringTobaccoFermentationFANYi-wen,LINMei-yan,LIXu-dong,LIZhe,CHENYa-wen,HANShuang-yan(SchoolofBioscienceandBioengineering,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510006,China)Abstract:Microorganismsplayanimportantroleinto
4、baccoaromaimproving.Thetobaccosampleswereselectedfromfiveareas(Bijie,Chuxiong,Kunming,Qujing,andXiangxian)ofthreeyears(2007,2008and2009),usingnutrientagarforpurification,andthenculturedinthescreeningxylanasebaseforrescreening.Thexylanase-producingstrainswasscreenedb
5、ydeterminingtheappeartransparentcirclesamongthecoloniesafterCongoredstaining.Thexylanaseactivitiesofthesestrainsweremeasuredby3,5-Dinitrosalicylicacid(DNS).Qb4strain,whichhadhigherxylanaseactivity,wereidentifiedasBacillusmethylotrophilusbyanalysisofitsmorphological,
6、physiologicalandbiochemicalcharacteristics,carbonsourceutilizationandthe16SrRNAconservedsequence.Keywords:tobacco;xylanase;purification;identification;screening;木聚糖酶(XylanaseE.C3.2.1.8)是一种主要的气中致香成分的组成和含量作为标准来衡量的,而烟木聚糖降解酶类,通过内切的方式降解木聚糖中1,4叶的发酵醇化则是提高烟叶品质和可用性的重要环节木糖苷键,
7、水解产物以低聚木糖为主,并伴有少量的之一[5]。发酵醇化过程中,微生物、酶及相关化学物木糖和阿拉伯糖[1]。木聚糖在自然条件下很难被降解质的协同作用,可以诱发一系列生化反应,改善烟叶利用,使用化学方法可以提高木聚糖的降解率,但是品质和香气状况[6~7]。更为重要的是,微生物发酵及生会导致环境污染,而酶解法则不存在这个缺点,木聚物酶的作用相比过滤嘴过滤等物理手段来说,能够降糖酶能够降解烟叶或其他物质中的木聚糖生成功能性解烟叶中的烟碱含量,也改进了卷烟的品质,尽量减低聚木糖产品[2]。木聚糖酶广泛存在于细菌、放线菌、少了烟叶中对人
8、体有害物质的含量。烟叶表面的微生真菌中,在烟叶工业、造纸工业、食品行业、纺织行物十分丰富,有细菌、霉菌、放线菌等,一般以细菌业、能源工业、发酵行业和饲料行业都有极大的应用为主。烟叶表面微生物在发酵醇化过程中产木聚糖酶,价值[3~4]。对于烟碱的降解[8]、降低有害物质、烟叶增