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1、仲恺农业技术学院学报,16(1):28~31,2003JournalofZhongkaiAgrotechnicalCollege文章编号:1006-0774(2003)01-0028-04拮抗细菌对6种植物病原菌的抑菌作用112游春平,肖爱萍,裘盛财(1.仲恺农业技术学院植保系,广东广州510225;2.江西农业大学农学院,江西南昌330045)摘要:分别就拮抗细菌生防菌2[短小芽胞杆菌(Bacilluspumilus)]和生防菌1[枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)]对稻瘟病菌(Magnapo
2、rthegrisea)、芦笋茎枯病菌(Phomopsisiasparagi)、尖镰刀菌(Fusariumoxysporum)、玉米小斑菌(Bipolariamaydis)、百合灰霉病菌(Botrytiselliptica)和青枯病菌(Ralstoniasolanacearum)6种植物病原菌的抑制作用进行了测定,结果发现,生防菌2发酵液50倍稀释液对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率为626%,100倍稀释液则为553%,对分生孢子附着胞形成的抑制作用不明显;将稻瘟病菌和生防菌2发酵液同时接入燕麦培养基中,生防
3、菌2对稻瘟病菌菌落的生长有明显的抑制作用;生防菌2对芦笋茎枯病菌、尖镰刀菌、玉米小斑菌和百合灰霉病菌分生孢子萌发的抑制作用不明显;生防菌1对青枯病菌生长有明显的抑制作用,而生防菌2对青枯菌抑制作用不明显。关键词:拮抗细菌;稻瘟病菌(Magnaporthegrisea);抑制作用+中图分类号:S47619文献标识码:A稻瘟病是世界各水稻产区的主要病害,其防治方法主要采取选育抗病品种,加强肥水管理以增强水稻的抗病能力,在发病期间及时辅以药剂防治等等.防治稻瘟病的农药主要有三环唑、富士一号、稻瘟净、
4、异稻瘟净等,而稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)对稻瘟净和异稻瘟[1][2,3]净已产生抗性.因此迫切需要开发新型杀菌剂以提高对稻瘟病的防治效果.作者已从稻叶上分离到对稻瘟病菌生长有显著抑制作用的两种拮抗细菌[短小芽胞杆菌(Bacilluspumilus)和枯草杆菌(B.subtilis)],现对它们在不同浓度下对稻瘟病菌分生孢子萌发的抑制率进行测定,并选择目前生产上普遍发生的植物病害(玉米小斑病、百合灰霉病、芦笋茎枯病和番薯根腐病)的病原菌作为抑菌测定对象,以期拓展拮抗细菌的防治范围.1材料与
5、方法1.1材料1.1.1拮抗细菌枯草芽胞杆菌(生防菌1)、短小芽胞杆菌(生防菌2),为作者从稻叶上分离.1.2.2病原菌稻瘟病菌、玉米小斑病菌(Bipolariamaydis)、百合灰霉病菌(Botrytiselliptica)、尖镰刀菌番薯专化型(Fusariumoxysporumf.sp.batatas)、芦笋茎枯病菌(Phomopsisas收稿日期:2002-11-08基金项目:江西省自然科学基金项目(0130027)和江西省科技计划重点项目(200110100109)资助.作者简介:游
6、春平(1962-),男,江西樟树人,教授,博士.第1期游春平,等:拮抗细菌对6种植物病原菌的抑菌作用29paragi)、青枯病菌(Ralstoniasolanacearum),由江西农业大学农学院植病教研室提供.1.1.3培养基酵母浸膏培养液(NB)蔗糖20g,酵母浸膏12g,K2HPO44g,蒸馏水1000ml;酵母浸膏培养基(NA)NB+琼脂(20g);燕麦培养基燕麦片30g,琼脂18g,蒸馏水1000ml.PDA培养基马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000ml.1.2方
7、法1.2.1稻瘟病菌培养及分生孢子悬浮液配制将稻叶表面分离的稻瘟病菌移植于燕麦培养基上,25~30培养7d左右,待菌落面积达培养皿面积2/3时,22光照培养3d,表面长满分生孢子后取出.用无菌水制备稻瘟病菌分生孢子悬浮液,分生孢子浓度为低倍镜下每视野30~50个孢子.[4]1.2.2拮抗细菌的培养参照孔建等的方法,将生防菌1和2分别接种于盛有150mlNB培养液的三角瓶中,30240r/min震荡培养48h.561.2.3拮抗细菌浓度的测定将1.2.2中培养的生防菌悬浮液用无菌水稀释至10、
8、10和710倍,分别取0.2ml稀释液滴入灭菌培养皿中,并倒入15ml溶化后冷却至45左右的NA培养基,迅速旋转混匀,凝固后30培养12h,记录菌落数.每处理3次重复.1.2.4拮抗细菌对稻瘟病菌分生孢子的萌发及附着胞形成的抑制作用测定分别取稀释50倍和100倍的生防菌2发酵液的上清液各20l,与20l稻瘟病菌分生孢子悬浮液混合后滴加于凹玻片的凹穴中,保温培养12h,镜检;以无菌水加稻瘟
