体外培养小鼠小肠Cajal间质细胞的电生理学特性_张扬

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1、上海交通大学学报(医学版)Vo.l27No.11Nov.2007JournalofShanghaiJiaotongUniversity(MedicalScience)
1301
文章编号:
0258-5898(2007)11-1301-04
基础研究
体外培养小鼠小肠Cajal间质细胞的电生理学特性张
扬,
朴莲花,
黄
旭,
韩燕飞,
赵
鹏,
许文燮(上海交通大学医学院基础医学院生理学教研室,上海
200240)摘
要:目的采用膜片钳技术观察体外培养的小鼠Cajal间质细胞(ICC)的电生理学特性,为进一步研究不同种类ICC的功能奠

2、定实验基础。方法用C-Kit染色法对ICC进行形态学鉴定后,分别在全细胞模式、膜内向外和细胞吸附的钳制模式下,观察胞内低钙和钙调蛋白抑制剂对ICC起搏电流的影响。结果免疫学鉴定结果表明,培养的大部分细胞均为ICC。在全细胞模式下,高浓度钙鳌合剂使细胞内游离钙浓度降低后,可以激活持续性内向电流;在膜内向外的膜片钳模式下,当灌流液中钙浓度由1
mol/L降低到0.1
mol/L时,激活幅度大和频率快的自发性内向电流;在全细胞模式下,钙调蛋白抑制剂(W-7)可以激活持续性内向电流的同时增加自发性内向电流的幅度;在细胞吸附模式下,W-7激活幅度

3、大和频率快的自发性内向电流。另一种细胞电生理学特性却不受细胞内低钙环境和W-7的影响。结论在培养的ICC中对细胞内低钙和W-7敏感的细胞可能就是具有起搏功能的肌层间ICC,而对细胞内低钙和W-7不敏感细胞可能就是不具有起搏功能的肌间ICC。关键词:Cajal间质细胞;
钙调蛋白抑制剂;
胞内游离钙中图分类号:Q424;
Q813.1



文献标志码:AElectricalcharacteristicsofinvitroculturedinterstitialcellsofCajalfrommurineintestineZHANGYan

4、g,PIAOLian-hua,HUANGXu,HANYan-fe,iZHAOPeng,XUWen-xie(DepartmentofPhysiology,BasicMedicalCollege,SchoolofMedicine,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai
200240,China)Abstract:
Objective
ToidentifytheelectricalcharacteristicsofculturedinterstitialcellsofCajal(ICC)frommurinesm

5、allintestinewithpatchclampexperiments,andlayafoundationforthefurtherinvestigationofthefunctionofdifferenttypesofICC.
Methods
Cu-lturedICCwasmorphologicallyidentifiedwithC-Kitimmunofluorescenceantibody.Whole-cel,linside-outandon-cellmodepatchclamp2+techniqueswereusedtorec

6、ordmembranecurrentsafterdialyzingtheintracellularCaorapplyingthecalmodulininhibitor,W-7.Results
AlmostalltheculturedcellswereimmunopositiveforC-Kitantibodyprotein.Inwhole-cellpatchclampmode,decreasingthe2+intracellularfreeCabyusing10mmol/LEGTAinpipette,sustainedinwardhol

7、dingcurrentswereactivatedinICC,whilenoresponseinanotherICC.W-7elicitedsustainedinwardholdingcurrentandpotentiatedtheamplitudeofspontaneoustransientinwardcurrentsinICC,whilenoresponseinanotherICC.Ininside-outpatchclampmode,whentheintracellularcalciumwasdecreasedfrom1
mol/

8、Lto0.1
mol/L,singlechannelactivitiesweresignificantlypotentiated.Inon-cellmode,W-7alsosignificantlypote