成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞分化为肌细胞过程中的表达

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1、中国医学科学院学报ＡＣＴＡＡＣＡＤＥＭＩＡＥＭＥＤＩＣＩＮＡＥＳＩＮＩＣＡＥ·论著·成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞分化为肌细胞过程中的表达１１１１２柳太云，代宏，林军，李玫，熊符，２２２冯善伟，张亚妮，张成１贵州省人民医院神经内科，贵阳５５０００２２中山大学第一附属医院神经内科，广州５１００８０通信作者：张成电话／传真：０２０８７３３２３８７，电子邮件：ｃｈｅｎｇｚｈａｎｇ１００＠ｈｏｔｍａｉｌｃｏｍ摘要：目的研究成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞（ｈＢＭＭＳＣｓ）分化为肌细胞过程中的表达情况。方法体外培养ｈＢＭＭＳＣｓ，采用免疫荧光

2、法和ＲＴＰＣＲ检测ｈＢＭＭＳＣｓ中成肌性标志物ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ及ｄｅｓｍｉｎ的表达。将７１×１０个ｈＢＭＭＳＣｓ经尾静脉注入免疫抑制的ｍｄｘ小鼠体内，于移植后２～２４周处死，采用免疫荧光法和ＲＴＰＣＲ检测小鼠骨骼肌内ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ、ｄｅｓｍｉｎ和人特异性抗肌萎缩蛋白（Ｄｙｓ）的表达。结果每１００个ｈＢＭＭＳＣｓ中ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ和ｄｅｓｍｉｎ阳性细胞数分别为２３５±５３、３０７±６２和２８４±５７，第５代ｈＢＭＭＳＣｓ中可检测到ＭｙｏＤ、ｍｙｏｇｅｎｉｎ和ｄｅｓｍｉｎｍＲＮＡ表达。ｈＢ

3、ＭＭＳＣｓ移植后２周，ｍｄｘ小鼠骨骼肌内可检测到少量ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎ阳性细胞，４周后可检测到少量ｄｅｓｍｉｎ阳性细胞。ｈＢＭＭＳＣｓ移植后２～４周，骨骼肌中开始出现ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎｍＲＮＡ表达，１２～１６周较强；移植后８周开始出现ｄｅｓｍｉｎｍＲＮＡ表达，１６周后表达渐增强。ｈＢＭＭＳＣｓ移植后４周，ｍｄｘ小鼠骨骼肌肌膜可见少量人特异性Ｄｙｓ阳性细胞，８周后开始出现ＤｙｓｍＲＮＡ表达，随着移植后时间延长，Ｄｙｓ表达逐渐增强。结论ｈＢＭＭＳＣｓ具有向骨骼肌细胞分化的潜力，能在受体内分化为骨骼肌细胞。在ｈＢＭＭＳＣｓ

4、分化为肌细胞的过程中，ＭｙｏＤ和ｍｙｏｇｅｎｉｎ表达上调可能发挥了重要作用。关键词：Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症；骨髓；间充质干细胞；成肌性标志物中图分类号：Ｒ７４６２文献标志码：Ａ文章编号：１０００５０３Ｘ（２０１０）０５０５１６０５ＤＯＩ：１０３８８１／ｊｉｓｓｎ１０００５０３Ｘ２０１００５０１０ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＭｙｏｇｅｎｉｃＭａｒｋｅｒｓｉｎＳｋｅｌｅｔａｌＭｕｓｃｌｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ１１１１２ＬＩＵＴａｉｙｕｎ

5、，ＤＡＩＨｏｎｇ，ＬＩＮＪｕｎ，ＬＩＭｅｉ，ＸＩＯＮＧＦｕ，２２２ＦＥＮＧＳｈａｎｗｅｉ，ＺＨＡＮＧＹａｎｉ，ＺＨＡＮＧＣｈｅｎｇ１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ＧｕｉｚｈｏｕＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕｉｙａｎｇ５５０００２，Ｃｈｉｎａ２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＮｅｕｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳＵＮＹａｔｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１００８０，ＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧＣｈｅｎｇＴｅｌ／Ｆａｘ：０２０８７３３２

6、３８７，Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｇｚｈａｎｇ１００＠ｈｏｔｍａｉｌｃｏｍＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｍｙｏｇｅｎｉｃｍａｒｋｅｒｓＭｙｏＤ，ｍｙｏｇｅｎｉｎ，ａｎｄｄｅｓｍｉｎｉｎｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ（ｈＢＭＭＳＣｓ）ＭｅｔｈｏｄｓＭｙｏｇｅｎｉｃｍａｒｋｅｒｓＭｙｏＤ，ｍｙｏｇｅｎｉｎ，ａｎｄｄｅｓｍｉｎｏｆｈＢＭＭＳＣｓｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｖｉｔｒｏｗｅｒ

7、ｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙ基金项目：国家自然科学基金（３０３７０５１０）和贵州省科技基金（［２００７］２１１６）ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（３０３７０５１０）ａｎｄｔｈｅＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＧｕｉｚｈｏｕＰｒｏｖｉｎｃｅ（［２００７］２１１６）５１６()*"+,-.%/0/成肌性标志物在人骨髓间充质干细胞分化为肌细胞过程中的表达ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｎｄＲＴＰＣＲＡｔｏｔａｌｏｆ２１８ｔｏ１０ｗｅｅｋｏｌｄｉ

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