玉米异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及其功能分析

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1、西北植物学报,2008,28(9):1715—1719AetaBot.Borea1.-Occident.Sin.文章编号:1000—4025(2008)09—1715—05玉米异戊烯基焦磷酸异构酶基因的克隆及其功能分析王伟,陆辉强,刘万宏。,潘夕春,陈敏。,廖志华(1西南大学生命科学学院三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715;2西南大学药学院三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715;3重庆科技学院生物系,重庆400042)摘要:以玉米嫩叶为材料,采用RT—PCR技术克隆了植

2、物萜类物质前体生物合成过程最后一个关键酶——异戊烯基焦磷酸异构酶(IP1)基因的全长eDNA,命名为ZmIPf(GenBank登录号为AY738148),该基因eDNA全长为1382bp,包含1104bp的开放阅读框,编码367个氨基酸残基。颜色互补分析表明ZmIPI能推动工程菌XL1一Blue+pTrcZmlPI+pAC—BETA超量表达0一胡萝卜素,证实ZmlPI具有典型的IPI基因的功能。关键词:异戊烯基焦磷酸异构酶;克隆;8一胡萝h素;颜色互补;玉米中图分类号:Q789文献标识码:ACl

3、oningandFunctionalAnalysisofanIsopentenylDiphosphateIsomeraseGenefromMaizeWANGWei,LUHui—qiang,LIUWan—hong~,PANXi—chun,CHENMin,LIAOZhi—hua(1KeyLaboratoryofEco—environmentsinThreeGorgesReservoirRegion,MinistryofEducation,SchoolofIAfeSciences,South—west

4、University,Chongqing400715,China:2KeyLaboratoryofEco—environmentsinThreeGorgesReservoirRegion,MinistryofEducation,CollegeofPharmaceuticalScience,SouthwestUniversity,Chongqing400715,China;3DepartermentofBiology,ChongqingUniversityofScienceandTechnolog

5、y,Chongqing400042,China)Abstract:Isopentenyldiphosphateisomerase(IPI)isthelastkeyenzymeofDXP/MVApathwayinbiosyn—thesisofplantterpenoidprecursors.ThecodingsequenceofIPIgenewasclonedfromZeamaysbyreverse—transcriptionpolymerasechainreaction,whichwasdesi

6、gnatedasZmlPI(GenBankaccessionNo:AY738148).Thefull—lengtheDNAofZmlPIis1382bpcontaininga1104bpopenreadingframe(ORF)encodinga367一amino—acid.ColorcomplementationassayindicatedthatZmIPIcouldpromotethet?-earo—teneaccumulationinengineeredXL1一BluehaboringpT

7、rcZmIPIandpAC—BETA,andas3resulttheengi—neeredbacteriashowedthebrightlyorangegivenbyt?-carotene.ThissuggestedthatZmlPIhadthetypicalfunctionofknownIPIgenes.Keywords:IPI;cloning;8_carotene;coloreomplementation;maize5一碳化合物异戊烯基焦磷酸(isopentenyl合物生物合成的中心化合物和

8、重要前体分子,它diphosphate,IPP)和它的异构物二甲基烯丙基焦磷们是经典的DXP/MVA途径的产物,两者在异戊烯酸(dimethylallyldiphosphate,DMAPP)是萜类化基焦磷酸异构酶(isopentenyldiphosphateisomer一收稿日期:2008—04-11;修改稿收到日期:2008—08—15基金项目;国家自然科学基金项目(30500303)作者简介:王伟(1982一),男(汉族),在读硕士研究生,主要从事药用植物的生物技术与生化工程研究。E—mai

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