中脑导水管周围灰质内注射抗阿片肽血清对神经降压素增强电针镇痛的影响

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1、生理学报,1999年4月,51(2),219～223219ActaPhysiologicaSinica研究简报组胺对大鼠小脑皮层3浦肯野细胞的兴奋作用33333田　乐　温云卿　李红召　熊化保　王建军(南京大学生物科学与技术系,南京210093)摘　要在离体大鼠小脑脑片上观察了组胺对小脑皮层第Ⅹ小叶浦肯野细胞的作用。组胺(3～100μmol/L)主要引起浦肯野细胞的兴奋反应(9414%,51/54),在少数细胞上也观察到组胺2+2+所引起的放电抑制现象(516%,3/54)。用低Ca/高Mg人工脑脊液灌流脑片,不能取消浦肯野细胞对组胺的兴奋反应(n=4

2、)。H2受体对抗剂ranitidine(011～5μmol/L)能够阻断浦肯野细胞对组胺的兴奋反应(n=20),而H1受体对抗剂triprolidine(015～5μmol/L)不能够(n=9)或仅轻微地(n=4)阻断浦肯野细胞对组胺的兴奋反应。这些结果提示,组胺可能主要通过H2受体的介导对浦肯野细胞起兴奋性调节作用,下丘脑2小脑组胺能神经通路可能参与了小脑的某些躯体的和非躯体的功能调节。关键词:组胺;小脑浦肯野细胞;下丘脑2小脑组胺能纤维;小脑脑片学科分类号:Q426　　组胺作为一种神经递质或调质的概念已经确立。免疫组织化学的研究表明,中枢组[1]

3、胺能神经元的胞体主要集中在下丘脑的结节乳头核,其纤维广泛地投射到不同脑区。在小脑中也发现有来自于下丘脑的组胺能神经纤维,它们广泛地分布于小脑皮层和小脑[1,2]核团,以蚓部和绒球小结叶最为密集,从而构成了下丘脑2小脑组胺能神经通路。放射配体标记和分子生物学研究证实,大鼠小脑皮层及小脑核团均存在组胺H1和H2受[1,3]体。目前,对组胺能传入纤维在小脑机能活动中的作用还不清楚。我们先前的工作证[4]明,组胺可以调制小脑苔状纤维传入系统接替神经元颗粒细胞的电活动。本实验旨在观察组胺对小脑皮层主神经元浦肯野细胞(Purkinjecell,PC)电活动的影响

4、和介导组胺对PC作用的受体机制,以了解下丘脑2小脑组胺能纤维在小脑皮层机能活动中的作用。15只SD大鼠(体重200～300g)在乙醚麻醉下被断头并取出小脑。小脑组织块经冷冻1998204201收稿　　1998206207修回3国家自然科学基金(No139570246,39770249)、国家教委留学回国人员科研基金(No1952135)和江苏省自然科学基金(No1BK97045)资助项目33现在地址:DepartmentofMolecularNeurobiology,BrainResearchInstitute,NiigataUniversity,J

5、apan333通讯作者©1995-2005TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.220生　　理　　学　　报　　　　　　　　　　　　　　　51卷人工脑脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF)冲洗后,用振动切片机切取350～400μm厚蚓部矢状脑片。将脑片移入记录浴槽中孵育30min后开始实验。记录浴槽中持续地灌流ACSF[(33±012)℃,pH714,流量2～3ml/min],并通以95%O2和5%CO2混合气。ACSF中各溶质的浓度(mmol/L)

6、分别为:NaCl124,KCl5,MgSO4113,KH2PO4112,NaHCO326,CaCl2214,2+2+glucose10。在部分实验中使用了低Ca/高MgACSF灌流脑片,以阻断突触前神经纤维2+2+[4]的递质释放,此液的Ca浓度为0125mmol/L,Mg为410mmol/L。用玻璃微电极(内充2mol/LNaCl,直流阻抗2～3MΩ)在小脑皮层第Ⅹ小叶细胞外记录PC的单位电活动。待细胞的自发放电稳定之后,向记录浴槽灌流组胺(美国RBI公司,3～100μmol/L,持续1min),并观察PC放电活动的变化。在部分对组胺产生反应的细胞

7、上,进一步观察高选择性的组胺H1受体对抗剂triprolidine(美国Sigma公司,015～5μmol/L)和高选择性的组胺H2受体对抗剂ranitidine(RBI公司,011～5μmol/L)对组胺所引起的PC放电活动变化的影响。在使用这两种组胺对抗剂的实验中,受体对抗剂要在灌流组胺前预先持续地灌流脑片15min。所有药物均用ACSF新鲜配制。PC的放电信号经放大并由窗口甄别器转换成标准矩形脉冲后,输入计算机作刺激后时间直方图(采样bin宽1s),以评价药物对细胞的作用。数据的统计学处理用t测验。图　1PC对组胺的兴奋反应以及ranitidi

8、ne和triprolidine对PC兴奋反应的阻断作用Fig.1Excitatoryresponsesofa