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《动物性食品中兽药残留酶联免疫分析研究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第3卷第2期武汉生物工程学院学报Vol.3No.22007年6月ournalofWuhanBioengineeringInstituteune2007JJ动物性食品中兽药残留酶联免疫分析研究进展‘,2张泽英高小龙.,.,(l武汉生物工程学院生物工程系湖北武汉430415;2湖北大学科研处湖北武汉430062):、类型、摘要介绍了动物性食品中兽药残留酶联免疫分析技术的原理技术环节和国内外的应用,。现状并对其存在的问题和应用前景进行了讨论:;;关键词动物性食品兽药残留酶联免疫分析::中图分类号585,文献标识码A兽药的使用极大地提
2、高了畜产品、水产品的产定时用固相载体吸附抗体(抗原),加待测抗原(抗,,,量促进了畜牧业和水产业的发展但由此而产生体)再与相应的酶标记抗体(抗原)进行抗原抗体的食品安全问题已引起了人们的高度重视。许多的特异免疫反应,生成抗体(抗原)一待测抗原(抗、一,国家已制定了相应的法规来加强畜产品水产品中体)酶标记抗体(抗原)的复合物最后再与该酶的,、,,残留兽药的管理并为此投入了大量的技术资金底物发生反应生成有色产物待测抗原(抗体)的,,和人力来开发和应用兽药残留分析新技术如高效含量与有色产物的含量成正比因此可根据吸光值液相色谱、气相色
3、谱、质谱等。然而,这些技术需要对抗原或抗体进行定量分析。、、1.2ELIsA昂贵的仪器设备复杂的预处理熟练的技术人员检测方法的分类。-、和较长的分析周期酶联免疫分析技术(en:ymeELISA方法是用酶标记抗原半抗原或抗体,,,linkedimmunosorbentassayELISA)是而建立的方法将免疫技其分类至今无统一的标准常用的:、、术与现代测试手段相结合而建立的一种超微量的方法有间接法测抗体酶标抗原直接竟争抑制法,、、、测定技术因其特异性强灵敏度高检测快而被广酶标抗体直接竞争抑制法酶标抗体间接竞争抑制。泛应用于生物、
4、化工、医学、环境、农业等诸多领域法等在兽药残留检测中一般采用间接法测抗体’。,,「〕的分析研究当中随着对小分子物质的免疫原效价用竞争法测定食品中的兽药残留量其中酶,,性和半抗原研究的深人天然和人工合成的小分子标抗体间接竞争抑制法检测时可采用商品化的酶,,,,。化合物的免疫化学测定有了较快的发展因此越标二抗无需自己制备而被广泛运用来越多的小分子兽药残留分析采用了EIJSA方。2ELISA测定兽药残留的方法法2.1半抗原的设计1ELISA测定兽药残留的原理和分类,兽药大多属于小分子物质(半抗原)没有免疫1.1墓本原理原性,必须与载
5、体交联成人工合成抗原(完全抗原)E,。,lISA法是在荧光免疫和放射免疫分析的基才能获得免疫原性要实现与大分子物质的偶联础上发展起来的,是把抗原一抗体免疫反应的特异半抗原分子上必须具备能共价结合到载体上的活性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种检测、、经基和琉基等,性基团(如氨基梭基)对多数不具,。技术采用现代光学分析仪器进行光度测定测备活性基团的兽药可进行衍生化制备或由原料合:一一收稿日期20061222:一,,,:.1980.ail:anezzeo作者简介张泽英()女硕士研究方向食品分析Dmqiyy@163m武汉生物工程学
6、院学报2007,。、、成也可用其他代谢及降解产物作为半抗原有时采用的偶联反应有重氮化法碳二亚胺法混合酸,、。为了提高抗体效价和特异性通常需要在半抗原中醉法戊二醛法等[5]半抗原与载体偶联的效果会引人间隔臂。目前大多数学者认为川,间隔臂长度受到偶联物与偶联剂的相对比例、缓冲液成分、离..,、、为2~6个c(05~08nm)时能较好的突出与载子强度pH值以及半抗原的稳定性可溶性和理体结合后的抗原分子表面上具有特征立体结构和化特性等因素的影响。通常是在条件温和的水溶,。,、免疫活性的化学基团突出抗原决定簇间隔臂太液中将半抗原与载体蛋
7、白共价结合不宜在高温,、、。短载体的空间位阻影响免疫系统对半抗原特征结低温强碱强酸条件下进行构的识别,且半抗原的立体结构容易受到载体局部2.3兽药抗体的制备“”;:化学环境的影响而发生形变太长则可能因氢键抗体的产生一般可采用两种途径多克隆抗体。(某些极性间隔臂)、疏水作用(非极性间隔臂)或其技术和杂交瘤技术生产单抗多克隆抗体可用兽一“”。药载体蛋,他作用力使半抗原发生折叠间隔臂一般为非白结合物直接免疫兔子等动物从被免,,。,极性除了包含偶联所需要的功能基团外不应含疫的动物血清中获得这种抗体不均一来源间,,,,有其他的功能基团(
8、如苯环等杂环)以减少抗体对断有较大的批间差别但用于免疫分析效果良好。,间隔臂的识别由于免疫系统对载体远端的结构技术成熟目前绝大多数兽药免疫分析仍采用多克,。识别能力最强间隔臂远离待测物的特征结构部分隆抗体单克隆抗体应用于兽药残留分析开始于,,,和官能团有利于高选择性和高亲和性
