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时间:2019-05-24
《蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30%(W/V)组份浓度30%(W/V)Acrylamide配制量1LAcrylamide配制方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至1L,用0.45mm滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4℃保存。注意:丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。40%(W/V)组份浓度40%(W/V)Acrylamide配制量1LAcrylamide配制方法1
2、.称量下列试剂,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约600ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至1L,用0.45mm滤膜滤去杂质。4.于棕色瓶中4℃保存。注意:丙烯酰胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用具有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。10%(W/V)过硫酸铵组份浓度配制量配制方法5×Tris-Glycine组份浓度0.125MTris,1.25MGlycine,0.5%(W/V)SDS配制量1LBuffer配制方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。(SDS-PAGE
3、电泳缓冲液)2.加入约800ml的去离子水,搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存。5×SDS-PAGELoadingBuffer5ml1.量取下列试剂,置于10ml塑料离心管中。2.加去离子水溶解后定容至5ml。3.小份(500ml/份)分装后,于室温保存。4.使用前将25ml的2-ME加到每小份中。5.加入2-ME的LoadingBuffer可在室温下保存一个月左右。组份浓度0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇,10%(V/V)冰醋酸配制量1L配制方法1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。2.量取
4、250ml的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。3.加入100ml的冰醋酸,搅拌均匀。4.加入650ml的去离子水,搅拌均匀。5.用滤纸除去颗粒物质后,室温保存。组份浓度10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇配制量1L配制方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.充分混合后使用。组份浓度配制量配制方法组份浓度配制量配制方法组份浓度0.4%(W/V)AgNO3,1%(V/V)浓NH3·H2O,0.04%(W/V)NaOH配制量100ml配制方法1.量取下列试剂,加入100~200ml的试剂瓶中。2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混
5、浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。3.本染色液应现用现配,不宜保存。组份浓度0.005%(W/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛配制量1L配制方法1.称量下列试剂,置于1L试剂瓶中。2.加入1L去离子水后,摇动混合溶解。3.室温保存。
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