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1、吕,植物学通报一叨呈住蓝藻叶绿素提取方法的比较徐黎路荣昭施定基中国科学院植物研究所,北京,。,蓝藻是一种古老的生物在生物进化中有着重要的意义由于蓝藻是原核生物其细胞,同时蓝藻能固结构比较简单外界条件的变动容易引起细胞内部生理生化等方面的变化,,,。,氮分布极广能在极端恶劣的条件下生存具有重要的学术和经济价值因此蓝藻是一‘”。,叶,个重要的研究对象在光合作用研究中绿素含量的测定是计算光合活性的基础对有,。,‘,,关的研究也是一项必不可少的基本侧定对蓝藻来说它只含叶绿
2、素而高等植物和,”‘,,一绿藻还含有叶绿素国内外广泛采用的方法用的丙酮提取叶绿索但也‘,,,比‘“有人对丙酮提取叶绿素的计算系数提出疑问并采用其它的试剂提取如甲醇以。。,,不或者乙醇二提取的温度条件除了室温还有在℃下或在低温下提取的做法用以,。同方法和在不同温度下测得的叶绿素数值往往是不尽相同的究竟什么方法和温度条件得出的数值更,,接近真实的含量能够为蓝藻的生理生化和光合研究提供较为合理的基数是个尚未解决好的问题。为此我们将甲醇、乙醇和丙酮三种有机溶剂提取叶绿素的方法进行比较,的适宜、。探求提取蓝藻叶
3、绿素方法温度和时间材料与方法实验材料为柱袍鱼腥藻。。。。。川云。公。。和满江红鱼腥藻,。。。。。。加。。‘、、、、〔。之们属蓝藻门藻殖段纲念珠藻目念珠藻科鱼腥藻属无菌培养在‘〕。,,,。无氮培养液里温度为一℃为照光光强为一经常摇动取,。。,接种后天的藻体为材料其浓度约为光密度将取来的新鲜藻液摇匀以离心,,。、、分钟弃上清液留沉淀的蓝藻做样品用甲醇乙醇丙酮,,、浸泡蓝藻后以离心分钟取上清液测定用日
4、本岛津双光束分光光度计测光密,一,。度用。本岛津注。。。双波长双光束分光光度计测吸收光谱波长范围为一。八‘。叶绿素的计算按和认的公式团甲醇二··。。。·’“”乙醇‘二·。。丙酮,、,所用的试剂为无水甲醇分析纯北京化工厂无水乙醇分析纯北京化工厂丙酮,。分析纯仁海溶剂广结果与讨论,,实验表明由于试剂极性不同引起的叶绿素吸收光谱红区部分吸收峰峰值也略有不本文承蒙冯丽洁、张群和谭军
5、同志协助作吸收光谱,特此致谢。。,同在甲醇中吸收峰位于。在乙醇中位于,在丙酮。。中位于这与公式所测定的波长相一致一甲醇提取叶绿素,,分别在℃水浴中℃冰箱中和℃室温中用甲醇提取叶绿素在不同时间取。。,。样测定计算叶绿素浓度图表明甲醇在三种温度下都可将叶绿素迅速提取出来在,。。分钟后提取量就不再上升℃下提取量比其它两种温度下略高。一、声时℃一一,召℃…亡。石的℃丫第次提护一忘备阮乳东么即价肚八助‘甘椒长侧越截
6、珊古一巴汪,目口‘二二二称二二窗二二二雾二二二二二书—。忿,一一即亡盆名℃监“,‘二公之盏‘‘二监·让二二吐为户,目,目粼监二留留吟‘公场心洲‘‘目目巨,‘,月‘月一留一浦幻,时何小时佣波长图在不同温度下用甲醇提取叶绿素图甲醇提取液及第次提取液的吸收光谱为,。了证明甲醇提取叶绿素是否彻底对其沉淀用甲醇进行第次提取从两次提取液,。的吸收光谱图可以看出甲醇在三种温度下提取都比较彻底二乙醇提取叶绿素。。乙醇提取方式同,,仁图表明
7、℃时提取量最高充分提取的必须时间为分钟,℃℃,℃提取量稍低于℃提取量又低于℃℃和充分提取的必要时间为分钟比℃时所需要的时间长。、璐了侣℃一一℃,翻七下乙醉第次提取侧叫俐乳不衣乐‘么诊奋侧‘‘一妥仆全邵一侧滋报断日古详飞三要三三食份代六蕊二二六盆丁一,一二,下会二品二一众未一一必℃口—三即℃,斌℃—减之二时间小时攀二矍之之如一邵波长图图乙醇第次提取浓的吸收光谱在不同温度下用乙醇提取叶绿素次提取液和甲醇
8、第乙醇提取后的沉淀用甲醇进行再提取,测。,乙醇在℃时提将定其吸收光谱结果表明,,。,。取比较彻底℃次之℃时遗留的叶绿素较多参看图三丙酮赫携取升绦聚众。,。提取方式同
