复合神经营养因子应用于大鼠视神经损伤的研究

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1、中国药物与临床2007年6月第7卷第6期ChineseRemedies&Clinics,June2007,Vol7,No.6·425··实验研究·复合神经营养因子应用于大鼠视神经损伤的研究王宏成霄黎【摘要】目的观察玻璃体腔注射复合神经营养因子(睫状神经营养因子,CNTF和脑源性神经营养因子,BDNF)对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞存活的作用。方法60只健康成年大鼠、体重200～225g、雌性,随机分为对照组、CNTF治疗组、BDNF治疗组及复合神经营养因子(CNTF+BDNF)治疗组。各组又分为7、14、21d3个时间组,每组5只大鼠,每只动物进行单眼实验,另外一眼为正常对

2、照。荧光金逆行标记视网膜神经节细胞(RGCs),7d后做成视神经损伤模型。4组术后分别向玻璃体腔内注射生理盐水、CNTF、BDNF、CNTF+BDNF。按视神经损伤后不同时间点,分别将动物灌注固定。做全视网膜铺片,荧光显微镜下观察,在每张视网膜距视乳头1mm部位随机取4个视野拍片,对每个视野中标记的RGCs进行计数,求平均值,计算视神经损伤后玻璃体腔内注射不同药物、不同时间所剩余的RGCs数。结果视神经夹伤后各组RGCs随时间推移逐渐减少。与对照组相比,CNTF治疗组、BDNF治疗组及CNTF+BDNF治疗组7、14、21d各组RGCs数均明显多于对照组(P<0.01),且CN

3、TF+BDNF治疗组RGCs数亦明显多于单独应用一种神经营养因子的CNTF治疗组、BDNF治疗组(P<0.01)。结论在对大鼠视神经损伤的治疗中,应用CNTF+BDNF明显优于单独应用一种神经营养因子(CNTF或BDNF)。【关键词】视网膜神经节细胞;视神经损伤;睫状神经营养因子;脑源性神经营养因子CombineduseofneurotrophinsfortreatmentofopticnervelesioninratsWANGHong*,CHENGXiao-li.*De-partmentofOrbitalTumors,ShanxiProvincialEyeHospital,T

4、aiyuan030002,china【Abstract】ObjectiveToinvestigateinvivotheeffectsofcombinedneurotrophinsinjection(BDNFandCNTF)onsurvivalofretinalganglioncells(RGCs)afteropticnerveinjury.MethodsSixtyhealthyfemaleSprague-Dawly(SD)ratsweighing200~225gramswererandomlydividedintooneofthe4groups:controlgroup,BDN

5、Fgroup,CNTFgroupandcombinedneurotrophins(BDNFandCNTF)group.Eachgroupofratswasfurtherstratifiedinfivesintothreetimelevelsfrominjury:7day,14dayand21day,testedontherighteyeincontrasttotheleftonewhichwaskeptintact.TheRGCsofallratswerelabeledwithfluorogold.Sevendayslater,theopticnervewasintraorbi

6、tallycrushedandeachgroupwasinjectedinthevitreouscavitywithnormalsaline,CNTF,BDNF,orneurotrophins(CNTFandBDNF),respectively.Theratsweresubjectedtoperfusionfixationaccordingtodifferenttimelevels,andharvestedforstretchedslideofthewholeretina.Atfluoro-microscopyforeachslide,fourfields1mmawayfrom

7、theopticpapillawererandomlyselected,snapshotandcalculatedforthemeancountofFG-labeledsurvivingRGCsineveryfieldinre-lationtodifferentagentsinjectedanddifferenttimefrominjury.ResultsTheRGCsineachgroupdecreasedovertimefromopticnervecrushinjury.Compared