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《自体脂肪间充质干细胞移植促进声带修复再生的实验研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、自体脂肪间充质干细胞移植促进声带修复再生的实验研究胡蓉徐文范尔钟【摘要】目的探讨自体脂肪间充质干细胞移植入损伤声带后的生长分布及对声带固有层及其主要细胞外基质变化的影响特点。方法对34只实验用兔(68侧声带)的53侧声带进行全麻支撑喉镜下声带锐性损伤。分离培养、鉴定及定向诱导20只实验用兔脂肪间充质干细胞。将自体脂肪间充质干细胞植入20侧损伤声带后,示踪观察脂肪间充质干细胞在声带固有层内的生长分布;同时以单纯支架(胶原或透明质酸凝胶)植入18侧受损声带(胶原10侧,透明质酸8侧)及单纯损伤15侧声带作为对照组。术后15d~12个月时采用HE染色、Masson染色、A
2、lcianBlue染色及免疫组化染色观察声带形态学变化及声带固有层胶原、透明质酸、纤维连接蛋白的含量及分布变化。结果脂肪间充质干细胞呈梭形贴壁生长,具有多向分化潜能,植入损伤兔声带后持续分布于声带固有层。损伤声带在脂肪间充质干细胞植入6个月时形态接近正常,12个月时部分组织学结构类似正常;声带细胞外基质中的胶原于植入3个月内含量有增高趋势,无序分布于固有层,后逐渐减少至正常水平附近,12个月时部分分布略显不规则;透明质酸于植入40d含量亦有增高趋势,分布于固有层各层,6个月含量减至正常水平附近,局限于固有层浅中层;纤维连接蛋白于植入后始终在固有层内散在分布,含量在4
3、0d内有增高趋势,后逐渐减少,12个月时含量接近正常。单纯声带损伤3个月后局部开始出现瘢痕挛缩,以胶原纤维为主的大量纤维组织增生,12个月时仍紊乱分布于声带固有层各层。单纯支架植入组变化介于二者之间。结论脂肪间充质干细胞植入兔损伤声带后具有促进声带细胞外基质分泌、合理分布及部分有序化排列的功能,具有促进声带修复再生的作用。 【关键词】间质干细胞;脂肪组织;声带;创伤与损伤;再生;模型,动物;组织工程Characterizationofvocalfoldregenerationafteradipose-derivedmesenchymalstemcellsimplan
4、tingHURong*,XUWen,FANEr-zhong.*DepartmentofOtorhinolaryngologyHeadandNeckSurgery,BeijingTongrenHospital,CapitalMedicalUniversity,KeyLaboratoryofOtorhinolaryngologyHeadandNeckSurgery,MinistryofEducation,Beijing100730,ChinaCorrespondingauthor:XUWen,Email:entwen@trhos.com【Abstract】Objecti
5、veToinvestigatethetreatmentforinjuredvocalfoldsbyimplantingautologousadipose-derivedmesenchymalstemcells(ADSC),andtoobservethecharacteristicsoflaminapropriaofthevocalfoldsanditsmajorextracellularmatrix(ECM),aswellasthegrowthfeaturesofADSC.MethodsThelaminapropriawasinjuredbylocalizedres
6、ectioninfifty-threevocalfoldsofthirty-fourrabbits.Isolation,cultureandidentificationofADSCwereperformedintwentyrabbits.Threetofivedaysaftervocalfoldsinjury,autogeneicADSCwereimplantedintotheinjuredvocalfolds.Ascontrol,scaffolds(collagenorhyaluronicacid)andnonewereinjectedintoeighteenan
7、dfifteenvocalfoldsrespectively.Laryngeswereharvestedat15days,40daysand3,6,12monthsafteroperation.ThegrowthanddistributionofADSCweredetectedbyDAPIstain.Meanwhile,HEstainingwasperformedforhistopathologicresearch,Massontrichromestaining,AlcianBluestainingandimmunohistochemicalstainingwe