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时间:2019-05-24
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1、包埋时间50%酒精:1个小时70%酒精:1个小时80%酒精:1个小时90%酒精:1个小时95%酒精:1个小时无水酒精1:1个小时无水酒精2:1个小时无水酒精:二甲苯1:11个小时二甲苯透明:时间不定二甲苯:石蜡1:120-1个小时不等石蜡1:1个半小时石蜡2:1个半小时包埋的时间不确定,由组织块的大小来决定,像一般的比较小的而且比较容易脱水的如消化道的胃、小肠等脱水半个小时至四十分就行,蝌蚪整体的话因为有皮肤包着所以时间要长一些至少一个小时这样算下来包完一套需要至少12个小时,包埋的关键不是脱水,而是在那两步1:1上,只要这两个过度做好了其余
2、的就很顺畅了,只要1:1时间够了透明时间就可以适当的短一些,一般不要超过1分钟,30秒左右就可以。想做好石蜡切片从取材到染色每一步都很重要,可以说是环环相扣,哪一步没做好都会影响最终的结果。现在从取材说起,取材时要迅速,以免组织自溶,固定要充分,固定液我们一般用的有两种,一是10%中性福尔马林溶液,第二是Bouin氏液,这个根据组织来决定用哪个,要是整体固定蝌蚪的话可以用浓度稍高一些的福尔马林,一般可以用12—15%的福尔马林。取下的材料需固定一段时间,至少要过夜,若是固定时间比较长的话需要用流水冲洗一个晚上第二天再脱水包埋,时间短的话,第二
3、天可以直接用水泡一个半小时即可进行包埋,当然这其中要换几次水。包埋完切片,捞出的片子至少烘干一个晚上的时间。二甲苯2:30分钟二甲苯1:30分钟酒精:二甲苯1:1:10分钟无水酒精2:5分钟无水酒精1:5分钟95%;5分钟90%:5分钟80%:5分钟70%:5分钟50%:5分钟流水冲洗苏木精时间不定,视当时染液的情况而定。一般5-10分钟,甚至更长。流水冲洗50%:5分钟70%:5分钟80%:5分钟90%:5分钟伊红30秒,吸水纸上吸一下染液95%:蘸三下无水酒精1:5分钟无水酒精2:5分钟酒精:二甲苯1:110分钟二甲苯1:30分钟二甲苯2
4、:30分钟染色整个过程大约需要四个小时,每一步都要用吸水纸蘸几下;整个实验下来至少需要两天半时间。具体问题不明白的话再问我吧,也可以上网去查一下别人怎么做的。
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