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1、乌鸡白凤口服液对雄激素致不孕大鼠子宫内膜及肌层的影响作者：宋翠淼1,杜惠兰2,马爱蕊3,岳华1单位：河北医科大学:1基础课教学部生理学教研室,2中西医结合学院中西医结合妇产科教研室,石家庄050091,3河北省胸科医院普通内科,石家庄050041 转化生长因子β1(TGF-β1)协同其它细胞因子共同调节子宫内膜功能,维持子宫内膜组织内环境的稳定[1]。乌鸡白凤口服液具有补气养血、调经止带之功能。本研究观察乌鸡白凤口服液对雄激素致不孕大鼠(ASR)模型子宫内膜(腺细胞、间质细胞)和肌层转化生长因子β1及其
2、受体(TGF-βRⅠ)表达的影响,进而探讨该药如何调节子宫的功能。1 材料与方法1.1 材料 丙酸睾丸酮(天京市氨基酸公司生产,合格证号:0203232);乌鸡白凤口服液(北京同仁堂制药厂生产,合格证号:3260008);一抗TGF-β1、TGF-βRⅠ(兔抗大鼠、小鼠)工作液;ABC试剂盒。1.2 方法1.2.1 ASR模型建立、动物分组及给药方法 参照魏美娟等[2]实验方法。9日龄同批出生SD雌性大鼠[华中科技大学同济医学院实验动物学部提供,合格证号:(鄂医动字)19-020]30只,分为正常组、
3、模型组、治疗组各10只。模型组及治疗组颈背部皮下一次性注射丙酸睾丸酮1.25mg。70d龄起做连续阴道脱落细胞涂片10d,阴道上皮细胞持续角化,提示ASR模型复制成功。81d龄起,治疗组灌服乌鸡白凤口服液,每100g给药1m,l连续7周。1.2.2 标本制备及检测方法 于给药6周后每日上午做阴道涂片1次,连续1周,处死前2d,每隔2h涂片1次,以确定动情周期。130、131日龄正常组、治疗组处于动情后期大鼠及模型组大鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠麻醉,剖腹,取出子宫,用HE染色观察子宫形态学变化;用ABC试剂盒(由VECTOR提供)免疫组
4、化染色检测TGF-β1及TGF-βRⅠ在子宫内膜和肌层的表达。1.2.3 图像分析 各组分别随机选取3只大鼠子宫做ABC免疫组织化学染色切片,每个子宫选取1张切片进行分析,每张取子宫内膜和肌层两区,每区取5个视野,应用LeicaIM50Version:1.20Release扫描系统,Motic数码医学图像分析系统分析其表达强度。吸光度值越高,表达越强(褐色为表达)。1.3 统计学分析 所有数据用-x±s表示,采用SPSS11.5统计软件,组间比较采用单因素方差分析。2 结果2.1 大鼠子宫组织形态
5、学观察 正常组大鼠子宫内膜厚,腺体丰富,肌层厚;模型组大鼠子宫内膜明显萎缩,腺体减少,肌层较正常组变薄;治疗组较模型组大鼠子宫内膜增厚,腺体数目增多,肌层增厚。2.2 大鼠子宫内膜和肌层TGF-β1及其受体的表达 与正常组比较,模型组TGF-β1在子宫内膜、肌层表达明显降低(P<0•01);与模型组比较,正常组、治疗组TGF-β1在子宫内膜、肌层表达明显增加(P<0•01)。 与正常组比较,模型组TGF-βRⅠ在子宫内膜表达明显升高(P<0•
6、05),而在肌层的表达明显降低(P<0•05),见表1。表1 大鼠子宫TGF-β1、TGF-βRⅠ平均光度值比较(-x±s,n=15)TGF-β1TGF-βRⅠ组别内膜肌层内膜肌层正常组0.0587±0.00710.0701±0.01250.0407±0.00400.0564±0.0045模型组0.0432±0.0102a0.0490±0.0112a0.0520±0.0
7、069b0.0507±0.0047b治疗组0.0816±0.01840.0665±0.01780.0513±0.00700.0490±0.0076a:P<0•01,与正常组、治疗组比较;b:P<0•05,与正常组比较3 讨论 TGF-β1能刺激子宫内膜间质细胞合成甲状旁腺激素相关蛋白,从而引起子宫内膜细胞环磷酸腺苷升高,对子宫内膜生长起升调作用。另外,TGF-β1参与子宫内膜间质细胞的凋亡,并能调节子宫内膜从增殖
8、向分泌阶段的转化[3];还同其他细胞因子协同作用促进细胞外基质的合成,提高子宫内膜容受性,这些都有利于胚泡着床。 ASR模型较正常大鼠有高雄激素、无排卵的现象。与正常组比较,模型大鼠子宫内膜萎缩,腺体减少,肌层变薄。子
