Cre重组酶的研究进展

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1、万方数据第40卷第12期东北农业大学学报40(12)：125-1292009年12月JournalofNortheastAgriculturalUniversityDec．2009Cre重组酶的研究进展吕涛1，乔琰2，王勇p(1．东北农业大学园艺学院，哈尔滨150030：2．沈阳市植物园景观部，沈阳110000)摘要：Cre重组酶来源于噬菌体P1基因组中的一段DNA序列编码的蛋白，是一种无需辅助因子即可进行位点特异性重组的生物酶。它的发现为基因靶位操作创造了有利条件，由于其作用方式高效简单，Cre定位重组系统已在特定基因的删除、基因功能的鉴定、外源基因的整合、基

2、因捕获及染色体工程等方面得到了有效的利用，文章就Cre重组酶的结构、功能、突变分析和改造及Cre重组酶的应用潜力等方面的研究进行了综述。关键词：Cre重组酶；定位重组；进展中图分类号：Q55文献标识码：A文章编号：1005—9369(2009)12—0125—05ResearchprogressofCrerecombinase／LvTa01，QIAOYan2，WANGYon91(1．CollegeofHorticulture，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；2．ShenyangBotanica

3、lGardenLandscapeDivision，Shenyang10000，China)，Abstract：TheCrerecombinase，aDNA-encodedproteinfrombacteriophageP1genomesequence，isakindofenzymeofsite—specificreorganizationwithoutsupportingfactor．Itsfoundhascreatedfavorableconditionsfortheoperationofthegenetarget．Becauseofitssimplicity

4、andhighefficiency，Cresite-specificrecombinationsystemhasbeenwidelyusedingenedeletionandfunctionidentification，genesite—specificintegration，genetrappingandchromosomeengineering。ithasbeenusedasausefultoolforbiology．Inthearticle，itsummarizedthestudyofthestructure，function，mutationanalys

5、isandmodification，andpotentialapplicationsofCrerecombinase．Keywords：Crerecombinase；site-specificreorganization；progressDNA重组酶是在19世纪90年代被发现的，很多噬菌体和酵母都可以编码这种酶旧，例如来源于噬菌体的重组酶Cre、来自于酵母的FLP等131，它们都可以在DNA特定的位点产生作用，造成DNA序列的插入、删除或反向。这种简单却完美的反应可以实现精确的基因重组，而且这种反应在真核生物中同样有效141。近年来运用Cre莺组酶系统已经成为目

6、前遗传重组技术中的有利手段之一，同时，也广泛应用于真核生物基冈组功能的研究151。Cre重组酶是一种无需辅助因子进行位点特异性重组的生物酶，它的发现为基因靶位操作创造了有利条件。Cre酶介导的遗传重组可进行定点、定时、定组织的特异性控制。该系统于1981年被首次发现，1993年被Cu等研究人员正式作为一种基因操作手段应用以来同，已广泛地应用于基因克隆、基因捕获、基因整合、基因删除等研究领域并体现出巨大优势。本文概述了Cre重组酶的结构与功能、生物学应用潜力以及应用中存在的问题，并对其应用前景进行了展望。1Ere重组酶的结构与功能I．ICre重组酶的结构与功能域C

7、re重组酶是由噬菌体P1基因组中大小为收稿日期：2008—12—29基金项目：东北农业大学博十启动基金作者简介：吕涛(1982一)，男，硕十研究生，研究方向为蔬菜乍物技术。+通讯作者：王勇，副教授，硕士生导师，研究方向为蔬菜生物技术。E-mail：acaciawy@yahoo．cola．cn万方数据东北农业大学学报第40卷1029bp的一段DNA序列编码的蛋白质，由343个氨基酸组成，分子质量为38．5ku，属于整合酶家族的一员f7】。其作用与酵母中的FLP重组酶作用相似，但又有所不同。在体外状态下，无辅助因子、拓扑异构酶和DNA不复制时也可发挥其生理作用。因这

8、种DNA重组过程容易在离