漆酶的来源与分离纯化技术_靳蓉

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1、第31卷第3期中国生漆Vol．31No．32012年9月JournalofChineseLacquerSep．201210．3969/j．issn．1000－7067．2012．03．003*漆酶的来源与分离纯化技术靳蓉张飞龙(西安生漆涂料研究所，陕西西安710061)摘要:漆酶最早是从漆树所产的生漆中发现的，广泛分布于高等植物和真菌，在昆虫和细菌中也有发现。它是一种含铜的多酚氧化酶，既是聚合酶，也是降解酶，参与愈伤组织形成、木质化过程、生漆成膜、氧化酚类、苯胺类等一系列有机化合物。漆酶的去甲基化作用可以使木质素降解，也能够参与自然界中花色的形成。漆酶的应用以分离纯化为基

2、础，主要用到沉淀、透析、色谱、电泳等技术。关键词:漆酶;来源;分离纯化Abstract:Laccase，firstlyfoundintherawlacquerofRhusvernicifera，iswidelydistributedinhigherplantsandfungi，andhasbeenfoundalsoininsectsandbacteria．Aspolyphenol－oxidasecontainingcopper，itispolymeraseaswellaslyasethatjoinsrenewaloftissue，lignifications，format

3、ionoflacquerfilm，oxidationofabroadrangeoforganicsubstrates，includingphenols，anilinesetc．Thedemethylationoflaccaseisappliedtolignindegradationandformationofcolorwithinnaturalflowers．Isolationandpurificationisthefoundationofapplication，includingsedimentation，dialysis，chromatographandelectro

4、phoresismainly．Keywords:Laccase;Origin;Isolationandpurification漆酶(Laccases，Lac，EC1．10．3．2)，即对苯二质就是催化生漆成膜固化的生物催化剂———酶，但酚:(双)氧氧化还原酶，又名酚酶，多酚氧化酶等，是是，遗憾的是吉田将其误以为是淀粉酶物质(diastatic一种含铜的糖蛋白氧化酶，它和植物中的抗坏血酸matter)。1894年，法国人G．Bertranel将促进生漆固氧化酶、哺乳动物的血浆铜蓝蛋白同属蓝色多铜氧化成膜的活性物质提取出来，并将这种蛋白质命名［1］化酶(bluemulti－c

5、opperoxidase)家族。在生漆为“Laccase”(即漆酶)，从此“漆酶”的概念确定并沿［3－5］中，漆酶是生漆固化成膜的生物催化剂，它催化漆酚用至今。1909年，Euler错误地认为G．Bertranel形成聚合物。在过去的数十年，漆酶由于其广泛而所谓的“漆酶”是单、双和三羟基酸的钙盐混合物，还绿色的可应用价值，备受研究者和生产加工者的关发现其中有柠檬酸、苹果酸和草酸等，并认为这些酸注，其身影几乎出现在化学、分析、食品、医疗、生物的钙盐是生漆成膜硬化的促进因子。随着科学技术和环保等各个领域，因此，漆酶研究也可以认为是漆的进步和相关研究的积累，1934年，P．Fl

6、eurg在众多［2］树资源的重要分支。漆酶理化特性研究基础上，采用硫酸铵沉淀法，建立漆酶最早是从漆树所产的生漆中发现的，1883了一整套从生漆中分离提纯漆酶的方法，这是早期年，日本学者吉田(Yoshi)发现在生漆中存在一种对分离提纯漆酶最有效方法。直到1939年，D．Kelin［6］热敏感的物质，这种物质能够促进生漆变色及硬化，才确定漆酶的本质是含铜蛋白质。基于自身的科学素养与大胆猜想，吉田推测这种物漆酶普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体的各种*收稿日期:2012－04－0872012年第3期靳蓉等:漆酶的来源与分离纯化技术器官或组织中，一般幼嫩部分含量较多，成熟部分含然漆

7、树漆酶的多寡，丰富的漆树资源为天然漆树漆量较少。目前漆酶的最普遍来源是真菌，已知在多酶的获得奠定了基础。［7］种真菌菌株分泌物中都检测到了漆酶的活性。相对于真菌而言，植物、动物、昆虫来源的漆酶研究资料稍少。漆酶作为生物产物，不仅具有参与应激防御反应、细胞壁重建、形态发生、与宿主相互作用、腐殖质的代谢更新等生物学功能，而且被广泛地应用于不同的工业氧化处理过程中，例如木质素的降解、各类漂白、生物去污、乙醇生产、生物传感器、生物燃料电池等。这些工业应用主要基于漆酶具有环境友好地［10］氧化不同的芳香族和非芳香族化合物的功能。随着图1