47个香菇主栽菌株的SCAR标记分子鉴别

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1、食用菌学报Z2010.17(2):7~14文章编号:100529873(2010)022000720847个香菇主栽菌株的SCAR标记分子鉴别122,32,31222,32,3赵微微,李海波,付立忠,吴学谦,许修宏,贺亮,程俊文,魏海龙,吴庆其12(东北农业大学,黑龙江哈尔滨150030;浙江省林业科学研究院,浙江省森林资源生物与化学利用重点实验室,3浙江杭州310023;丽水市食用菌研究开发中心,浙江丽水323000)摘要:利用前期研究开发的10个SCAR分子标记对47个香菇主栽菌株的基因组DNA进行扩增分析。基于SCAR标记在

2、检测菌株中的存在与缺失差异,7个香菇菌株被首先鉴别出来,其余40个菌株被分成11个小组,其中一些形态特征极为相近的菌株,如L241与L24124、闽丰1号与L12、Cr02与7402等被相互辨别。关键词:香菇;主栽品种;SCAR标记;分子鉴定;食用菌香菇(Lentinulaedodes(Berk.)Pegler)以究开发的10个SCAR分子标记对47个香菇主其营养、医疗价值和独特的口味闻名于世。目前栽菌株的基因组DNA进行扩增分析,以期明确[1]中国香菇的产量居世界第一位。不同香菇品多个SCAR标记的联合使用提高菌株鉴定效率种具有

3、不同的生物学特性和消费途径。我国香的可行性。菇菌种市场上“,同种异名”、“异种同名”现象严1材料与方法重。因此对香菇菌种进行可靠准确的鉴定事关香菇产业的发展。1.1材料近年,基于PCR的分子标记技术包括RAPD1.1.1供试菌株(RandomlyAmplifiedPolymorphicDNA)、试验菌株47个来自福建、浙江、上海等15个AFLP(AmplifiedFragmentLength省市。菌株名称、生产性状及主栽地见表1。Polymorphism)、ISSR(Inter2SimpleSequence1.1.2培养基Repe

4、ats)、SRAP(Sequence2RelatedAmplified斜面培养基:PDA。Polymorphism)等相继用于香菇菌株的亲缘关液体培养基:马铃薯20%,葡萄糖2%,[2~5]系、遗传多样性和菌株分型研究。上述标记KH2PO40.1%,MgSO40.05%,蛋白胨0.15%,技术所使用的或为通用引物或为成套设计引物pH自然。的随机组合,缺乏特异性。1.1.3试剂SCAR(SequenceCharacterizedAmplifiedDNA磁珠纯化试剂盒、PCR扩增试剂购自[6]Region)标记克服了RAPD标记的不稳

5、定性,杭州博日科技有限公司。已成功用于香菇菌株和灵芝种间的分子鉴1.1.4SCAR引物及序列[7~10]定,这些鉴定均是通过获得某个菌株的“株前期研究中,基于RAPD和SRAP分子标记特异性”SCAR标记来实现的。但在实际操作的大量筛选,从23个香菇标准菌株样品中相继中,很难从大量的香菇菌株中获得某个菌株特有开发出了10个稳定的SCAR标记SCAR1~10,的“株特异性”SCAR标记,尤其是在菌株间的亲SCAR标记的引物序列、最适退火温度和片段长缘关系较为接近时更加困难。本文利用前期研度见表2,引物由上海生工生物技术公司合成。收稿

6、日期:2010203217原稿;2010205221修改稿基金项目“:十一五”国家科技支撑计划课题“人工栽培食用菌优质新品种选育研究”(编号:2008BADA1B02)、浙江省创新团队建设与人才培养项目“现代食用菌技术创新团队建设”(编号:2009F20019)、浙江省农业科技成果转化资金项目“专用型香菇新品种推广与种性安全快速鉴定技术示范应用”的部分研究内容作者简介:赵微微(1984-),女,东北农业大学资源与环境学院和浙江省林业科学研究院联合培养硕士研究生,研究方向为食用菌遗传育种与生物技术。3本文通讯作者E2mail:ful

7、izhong@163.com©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net8食用菌学报第17卷表147个香菇主栽菌株的来源和生产性状Table1Sourcesandcommercialtraitsof47majorL.edodescultivarsinChina1)2)编号名称来源栽培方式生产性状主栽地1)2)3)No.StrainSourceCultivationCommercialtrai

8、tsMajorcultivationarea福建省三明市真菌研究中温型、高产Moderategrowth1L03AZj,Js,Sh,Fj,Gd所,SMyIFPtemperature,high2yield上海市农业科学中温型、早熟、高产Moderat

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