小鼠脊髓血管-神经干细胞龛与神经细胞的增殖和分化

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1、万方数据第45卷第2期2014年4月解剖学报ACTAANATOMICASINICAV01.45,No.2Apr.2014’155’小鼠脊髓血管-神经干细胞龛与神经细胞的增殖和分化席艳1’2薛帅1李莉莉1(1.河南大学神经生物学研究所,河南开封475004;2.聂梦月1邓锦波h河南大学医学院病理学教研室,河南开封475004)[摘要]目的探讨小鼠脊髓发育过程中血管一千细胞龛对神经干细胞分化、增殖和迁移的影响;探讨龛中的各种细胞、血管在发育中的变化及相互作用。方法发育过程中的胚胎鼠或生后小鼠150只,取脊髓腰膨大处的横断面切片。采用5一溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)免疫荧光标记神

2、经干细胞;用尼氏(Nissl)染色观察神经元的发育和形态变化;利用血管墨汁灌注结合免疫荧光三重标记的方法检测神经干细胞、神经元和神经胶质细胞在小鼠胚胎期及生后的形态分布变化;同时对脊髓内血管发育的动态变化进行形态学观察和体视学处理。结果妊娠14d(E14)小鼠脊髓内即有BrdU标记的阳性细胞,均匀分布。新生的神经元自神经管侧脑室下带迁移至中间层附近,逐渐分化为神经元,并集中于灰质呈现典型的“H”型。统计学分析表明,BrdU阳性细胞计数在发育中呈现抛物线,高峰值位于出生3d(P3)左右。此外,神经胶质细胞的祖细胞最早集中于边缘白质,随后又向中央的灰质回迁。血管发育经历了早期均

3、匀分布,成年后集中在灰质分布的过程。血管、神经干细胞、神经元和神经胶质细胞构成了所谓的血管一千细胞龛。血管.干细胞龛主要位于侧脑室下带和灰质附近,其中的血管、神经干细胞、神经元和神经胶质细胞互相交织、紧密联系。结论血管一神经干细胞龛与脊髓发育紧密联系,同时影响神经元、神经胶质细胞和血管的相互作用。血管一神经干细胞龛为脊髓发育及神经元和神经胶质细胞分化提供了适宜的微环境。[关键词]脊髓发育;神经干细胞;血管一神经干细胞龛;5一溴脱氧尿嘧啶核苷免疫荧光标记;血管墨汁灌注法;小鼠[中图分类号]R322.81[文献标志码]A[DOI]10.3969/j.issn.0529-1356

4、.2014.02.002Vascularandstem-cellularnicheandtheneuralproliferationanddifferentiationinspinalcordofthemouseXIYanl一,XUEShuail,LILi...1i,NIEMeng—yuel,DENGJin.b01+(,.InstituteofNeurobiology,He’nanUniversity,He’nanKa洳ng475004,China2.MedicalCollege,He’nanUniversity,He’nanKa治ng475004,China)[Abstr

5、act]ObjectiveTostudyhowthevascularandstem—cellularnicheaffecttheneuralproliferation,differentiationandmigrationinthemousespinalcordandtoinvestigatetheinteractionamongneurons,neurogliaandvasculatureinthedevelopingspinalcord.MethodsAtotalof150micefromE17toP180wereusedinthisproject.BrdUassay,

6、Nissl’Sstainingandimmunofluorescentlabeling(NeuNandGFAP)methodswereapplied.Bloodvesselsandneuralstemcellsweremeasuredwithstereologiealmethods.ResultsBrdUpositiveneuralstemcellsappearedevenlyintheembryonicspinalcordatasearlyasE14,andthenewbornneuronsmigratedfromthesubventicularzoneoftheneur

7、altubetotheintermediatelayeraroundit.Withageincreasing,theneuralstemcellsdifferentiatedintoneuronsgradually,andtheneuronsmainlyconcentratedintheputativegraymatterasa“H”shape.Accordingtothestatisticalanalysis.theBrdUpositivestemcellsdevelopedasparaboliccurvewit

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