mRNA差异显示技术及其在园艺植物上的应用_综述_

《mRNA差异显示技术及其在园艺植物上的应用_综述_》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、2009,38(1):78-84.SubtropicalPlantSciencemRNA差异显示技术及其在园艺植物上的应用(综述)1,211121刘凯，曾继吾，夏瑞，黄永红，陈金印，易干军（1.广东省农业科学院果树研究所，广东广州510640；2.江西农业大学农学院，江西南昌330045）摘要：mRNA差异显示技术是鉴别基因差异表达方法之一，已在生物技术相关领域中广泛应用。本文介绍mRNA差异显示技术的基本原理及主要优缺点，较详细地综述了该技术在园艺植物生物技术方面的最新应用状况及取得的研究结果。关键词：mRNA差异显示技术；园艺植物中图分类号：Q-33;S6文献标识码：A文章编号：1009

2、-7791(2009)01-0078-07mRNADifferentialDisplayandItsApplicationinHorticulturalPlants1,211121LIUKai,ZENGJi-wu,XIARui,HUANGYong-hong,CHENJin-yin,YIGan-jun(1.InstituteofFruitTreeResearch,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,Guangzhou510640,GuangdongChina;2.AgriculturalCollege,JiangxiAgriculturalUniver

3、sity,Nanchang330045,JiangxiChina)Abstract:mRNAdifferentialdisplayisausefultechniqueforanalyzingdifferentialgeneexpressionattranscriptionlevel.Thistechniquehasbeenusedabroadinthefieldofbiotechnology.TheprinciplesandcharactersofDD-PCR,itsapplicationsandresearchonthegardeningbiologicaltechniqueareintr

4、oducedinthispaper.Keywords:mRNAdifferentialdisplay;horticulturalplantmRNA差异显示技术(mRNAdifferentialdisp1ay,mRNADD-PCR)也称差示反转录PCR(DifferentialdisplayofreversetranscriptionalPCR，DDRT-PCR)，它是将mRNA反转录技术与PCR技术相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术。由于每一种组织细胞(包括同一组织细胞经过不同的处理)都有特异表达的基因谱，即特异的RNA指纹图谱，因此，该技术可广泛应用于分离鉴定组织特异性表达的基因。1

5、992年，美国科学家Liang等根据高等生物成熟的mRNA都带有polyA的特性，用特定的锚定引物反转录后，进行PCR扩增，建立了mRNA差异显示技术，并应用该技术对比人类乳腺癌细胞与正常乳[1]腺上皮细胞所表达的mRNA，以此来克隆癌细胞所特有的基因。差异显示技术为寻找新基因开辟了捷[2][3][4][5]径，是该领域的重大突破，目前已广泛应用于生物技术各个领域，如农业、植物、动物、医学、[6]菌类等，涉及基因诱导表达、杂种优势机理、植物抗逆性、发育分子机理、基因克隆等方面的研究，已成功分离到数百种基因，成为当前分离编码产物未知目的基因的一种快速而有效的方法。1mRNA差异显示技术原理根据

6、表达特性的差异可将高等真核生物基因分为两大类：一类称看家基因（house-keepinggene），以其组成型表达模式维持细胞的基本代谢活动；另一类称发育调控基因（developmentalregulatedgene），[7]以其时空特异性表达模式完成个体正常的生长、发育与分化。这种在生物个体发育的不同阶段，或是在不同的组织或细胞中发生的不同基因，按时间、空间进行有序的表达方式，叫做差别基因表达（differentialgeneexpress），它是细胞分化的基础。在真核生物细胞中约含有10万个基因，仅约10%～收稿日期：2008-11-03作者简介：刘凯（1982-），男，江西宁都人，硕士

7、研究生，从事果树生物技术研究。注：易干军为通讯作者。第1期刘凯,等：mRNA差异显示技术及其在园艺植物上的应用(综述)﹒79﹒15%的基因在细胞中表达，而且在不同发育阶段、不同生理状态和不同类型的细胞中表达的基因也不尽相同。基因的差异性表达不仅是细胞形态和功能多样性的根本原因，而且也是各种生理及病变过程的物质基础，因此分离、鉴定差异表达的基因具有重要的意义。mRNA差异显示技术正是对组织特异性表达的基因进行分