ABI-7500 2.0软件 相对定量

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2、仪器型号3.22.3在实验类型中，选择Quantitation-ComparativeCT(△△CT)2.4选择试剂种类2.5确认运行模式3.进入Setup下的PlateSetup界面，编辑基因（Target）及样本（Sample）：相对定量实验简易操作流程3.1在界面中设置基因及样品。利用添加新的基因，并在TargetName中编辑基因名称，Reporter和Quencher中选择所标记的荧光基团及淬灭基团。对于Quencher的选择，如果是MGB探针，请选择NFQ-MGB；如果是TAMRA探针，请选择TAMRA；如果是其他形式的非荧光淬灭基团（如BHQ），

3、请选择None。还可以利用其他按钮将之前已添加的基因进行保存(SaveTarget)或删除(DeleteTarget)。利用添加新的样本，并编辑样品名称。相对定量相对定量实验简易操作流程相对定量实验简易操作流程3.2在进行样品板的排布。利用鼠标单击或拖拽以选择反应孔，然后勾选左侧的基因及样本，同时在Task选项中指定该反应孔的类型（U代表未知样本，N代表阴性对照）。4.在“Selectrelativequantitationsetting”中设置内参基因及对照样本。相对定量相对定量实验简易操作流程相对定量实验简易操作流程5.进入RunMethod界面，设定反应

4、条件及反应体积。6.点击，文件储存成ExperimentDocumentSingleFiles（*.eds）格式，然后在Run界面按下按钮，反应即开始进行。相对定量相对定量实验简易操作流程相对定量实验简易操作流程7.实验结束后，点击界面右上角的Analyze按钮，软件将会显示实验结果：7.1在扩增图中（见上图），可通过更改PlotSettings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线，请将Threshold及Baseline打勾。7.2查看相对表达量结果时，利用PlotSettings选项，可以以不同方式显示相对表达量的结果。相对定量相对定量实验简易操

5、作流程相对定量实验简易操作流程7.3对于SYBRGreen法实验，可以在MeltCurve界面中查看熔解曲线。Fig97.4检测QCSummary结果，可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角形中的数字1代表有一种异常情况，2代表有两种异常情况，以次类推。详细信息及解决方案可以在FlagDetails中看到。8.分析之后的结果，可以利用菜单中的File>Export功能，导出Excel格式的结果。若想存储图片结果，可直接在图片上单击鼠标右键，选择Saveas，存成JPEG格式的图片。相对定量相对定量实验简易操作流程相对定量实验简易操作流程