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《离体培养嗅鞘细胞促进新生大鼠螺旋神经节细胞的存活》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生理学报ActaPhysiologicaSinica,April25,2010,62(2):115-121115http://www.actaps.com.cn研究论文离体培养嗅鞘细胞促进新生大鼠螺旋神经节细胞的存活刘全1，余洪猛1,3,*，戴春富1，李雯2，朱雅颖1，顾瑜蓉1，李华伟1复旦大学附属眼耳鼻喉科医院1耳鼻喉科；2中心实验室，上海200031；3复旦大学脑科学研究院，上海200032摘要：本文旨在探索离体实验中的嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)有无促进耳蜗听觉传入神经元——螺旋神经节细胞(spiralganglioncells,SG
2、Cs)存活作用及其可能机制。取成年大鼠嗅球和新生大鼠蜗轴组织块进行OECs与SGCs的培养，采用差速贴壁法纯化培养OECs。实验分OECs与SGCs共培养组和SGCs单独培养组。倒置相差显微镜下观察OECs和SGCs生长状态，神经营养因子受体p75免疫组织化学法鉴定OECs，神经元特异性标志物βIII-tubulin标记SGCs。为了研究OECs与SGCs共培养体系中，前者促进后者存活的可能机制，共培养组中分别加入脑源性神经生长因子(BDNF,500pg/mL)和BDNF抗体(IgY型，50μg/mL)，对照组为未加任何处理的共培养组，然后检查各培养组中SGCs存活数量和存活时间。结
3、果显示，OECs贴壁培养7d后形成一细胞单层，在OECs与SGCs共培养体系中，SGCs在OECs形成的细胞单层的表面生长，并伸出长突起，呈现典型的双极神经元形态；在培养的前6天内，随着培养时间的增加，两组中的SGCs都较接种前减少，但共培养组中SGCs存活数量明显高于SGCs单独培养组(P<0.01)；单独培养组的SGCs数量在培养的第6天出现大幅度减少，在培养的第9天几乎没有生长；共培养组的SGCs数量未见明显变化(P>0.05)；共培养中加入BDNF对OECs促进SGCs存活无明显影响，而加入BDNF抗体(IgY)后存活的SGCs减少(P<0.01)。本研究结果提示，OECs与
4、SGCs共培养能够促进新生大鼠SGCs存活和突起生长，延长存活时间，OECs分泌BDNF可能是促进SGCs存活的机制之一。关键词：嗅鞘细胞；螺旋神经节细胞；培养；脑源性神经营养因子；存活中图分类号：R339.12OlfactoryensheathingcellspromotethesurvivalofnewbornratspiralganglioncellsinvitroLIUQuan1,YUHong-Meng1,3,*,DAIChun-Fu1,LIWen2,ZHUYa-Ying1,GUYu-Rong1,LIHua-Wei11DepartmentofOtolaryngology,an
5、d2CentralLaboratory,EyeEarNoseandThroatHospital,FudanUniversity,Shanghai200031,China;3TheInstitutesofBrainScience,FudanUniversity,Shanghai200032,ChinaAbstract:Theobjectiveofthisstudyistoexplorewhetherolfactoryensheathingcells(OECs)canpromotethesurvivalofnewbornratspiralganglioncells(SGCs)andthe
6、underlyingpossiblemechanisms.Co-cultureofOECsfromadultratswithSGCsfromnewbornratcochleawasestablishedandsinglecultureofSGCsactedascontrol.OECswereobtainedandpurifiedbasedontheirspecialrateofattachmentwhichwasdifferentfromtheotherharvestedcelltypesduringculture.OECsandSGCswereimmunocytochemicall
7、ycharacterizedandconfirmedbyexpressionoflow-affinitynervegrowthfactorreceptorp75orpositivelabelofneuron-specificβIII-tubulin.ToinvestigatethemechanismsoftheroleofOECsinsurvivalofSGCs,brainderivedneurotrophicfactor(BDNF)andanti-BDN
