嗅鞘细胞及其相关细胞培养的基础性研究

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1、中图分类号：墅窆2：窆学科分类号：31Q：三垒论文编号：密级：公珏安徽理工大学硕士学位论文嗅鞘细胞及其相关细胞培养的基础性研究作者姓名：垄堡塞专业名称：鱼瘗堂研究方向：剑鱼鱼瘗堂导师姓名：奎麴昌≤塾握!熊昱≥导师单位：塞筮理至太堂答辩委员会主席：撕启安徽理工大学研究生处2012年5月日ADissertationinBiologyandImmunologBasicresearchoncultureofolfactoryensheathingcellsandrelatedcellsCandidate：HuaBaoan

2、Supervisor：LiChaopinMedicalSchoolAnHuiUniversityofScienceandTechnologyNo．168，ShungengRoad，Huainan，232001，P．R．CHINA独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方以外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塞徽堡三太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已

3、在论文中作了明确的说明并表示谢意。、／)学位论文作者签名：乏乞z幺涉日期力卯少年j_为哆日7●—弋=≯———’——一一一—广学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塞徵堡三太堂有保留、使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属于塞邀壅王太堂。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽理工大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书

4、)～／，学位论文作者签名：乏0牙涉签字日期：励y年朋尹k／导师签名：主嫩签字日期：沙，埤j、月习日摘要第一部分：小鼠嗅鞲细胞的分离培养和形态学的初步研究【摘要】目的：研究小鼠嗅鞘细胞(OECs)体外培养的不同方法，为获取数量多，活性好，形态优的嗅鞘细胞提供一定的实验基础。方法：4只出生2～3个月的BALBM小鼠，经枕骨大孔取嗅球，剥离嗅球外周两层制成细胞悬液。采取未纯化培养对照组、一次差速贴壁结合阿糖胞苷(Ara-c)纯化与多聚左旋赖氨酸包被培养板培养组(纯化包被组)和一次差速贴壁结合Ara-c纯化与未用多聚左旋

5、赖氨酸包被培养板培养组(纯化未包被组)分别培养小鼠OECs，观察其原代和传代培养的细胞生长状况及形态，并进行免疫细胞化学鉴定。结果：纯化未包被组OECs早中期无论数量还是形态都优于纯化包被组，而未纯化对照组的OECs早中期数量明显优于纯化组。结论：一次差速贴壁结合Ara．C纯化未包被进行小鼠OECs培养是一种简捷有效地方法。图8表2参考文献12关键词：嗅鞘细胞；细胞培养；形态学；免疫细胞化学第二部分：大鼠嗅鞘细胞的分离培养和形态学的初步研究【摘要】目的：研究大鼠嗅鞘细胞(olfactoryensheathingc

6、ells，OECs)体外培养的不同方法，为获取数量多、活性好、形态优的嗅鞘细胞提供一定的实验基础资料。方法：2只出生2"---3个月的SD(SpragueDawley)大鼠，经枕骨大孔取嗅球，剥离嗅球外周两层制成细胞悬液。采取一次差速贴壁结合阿糖胞苷(Ara-c)纯化与多聚左旋赖氨酸包被培养板培养(纯化包被组)和一次差速贴壁结合AFa-c纯化与未用多聚左旋赖氨酸包被培养板培养(纯化未包被组)分别培养大鼠OECs，观察其原代和传代培养的细胞生长状况及形态，并进行免疫细胞化学鉴定。结果：纯化包被组大鼠OECs无论数量

7、还是形态都优于纯化未包被组。结论：大鼠OECs培养时培养板必须进行包被处理。图7表l参考文献17关键词：嗅鞘细胞；细胞培养；形态学；免疫细胞化学第三部分：小鼠星形胶质细胞的分离培养和鉴定【摘要】目的：探索新生小鼠星形胶质细胞(astrocyte，AST)的分离、培养和鉴定以利于嗅鞘细胞(olfactoryensheathingcells，OECs)的培养。方法：取1只新生的BALB&小鼠，分离脊髓并制成细胞悬液、参照OECs的培养方法培养新生摘要小鼠脊髓星形胶质细胞，用GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、N200(神经

8、微丝蛋白)、S100(硫loo)免疫细胞化学染色方法分别鉴定。结果：S100免疫细胞化学染色的星形胶质细胞无论数量和形态都明显优于GFAP免疫细胞化学染色。结论：S100免疫细胞化学染色是鉴定星形胶质细胞最好的方法，星形胶质细胞培养可用OECs的培养方法，但须去除胰蛋白酶消化步骤。图7表0参考文献8关键词：星形胶质细胞；细胞培养；形态学；GFAP；S100第四部分：小鼠嗅