BD多色流式全面解决方案

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1、9/18/2014Identificationofimmunecellsubsetsbyeight-colorantibodystainingBD多色流式全面解决方案BD生物科学Judybdbiosciences.com/1TheBDHorizon™TourBDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/2NatRevImmunol,2012Eight-colorantibodypanelsproposedbytheHumanImmunophenotypingConsortium主要内容多色方案中荧光素选择的重要性荧光素同抗原的搭配优化仪器配置，提高分辨率多色Panel设计实例分析

2、NatRevImmunol,2012BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/3BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/4荧光素的选择是关键V450BV510BV605BV421流式多色方案中荧光素选择的重要性CD3CD4•合适的荧光素选择帮助我们更好的理解实验•对于弱的抗原，亮的染料尤为重要bdbiosciences.com/5TheBDHorizon™TourBDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/619/18/2014荧光素的选择是关键荧光素分辨率等级CD197(CCR7)BV421V450FITCPerCP-Cy5.5PECD3PE-CF594AlexaFlu

3、orAlexaFluor647700•等级由细胞经不同克隆，不同规格的抗体在多种流式细胞仪上的实验所得的染色指数（分辨选择正确的荧光素组合是回答生物学问题的关键率）的比较决定•激光器的能量，PMT电压，光学部件，抗体克隆和生物样品等多种因素均会影响荧光素/试剂在某个特定仪器上的效果BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/7BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/8基于仪器配置选择荧光素BDHorizonBrilliant™VioletBDFACSVerse™BDFACSVerse™BDLSR™FortessaBDLSR™FortessaBDAccuri™C6BDFACSCa

4、nto™IIBDFACSCanto™IIBDLSRFortessaX-20BDLSRFortessaX-20FITC（BB515）FITCFITCFITCPEPEPEFITC（BB515）488nmPEPE-CF594PerCP-Cy5.5PerCP-Cy5.5PerCP-Cy5.5PerCP-Cy5.5PerCP-Cy5.5PE-Cy7PE-Cy7PE-Cy7APCAPCAPCAPC640nmAPCAlexaFluor700AlexaFluor700APC-Cy7APC-Cy7APC-H7/APC-Cy7APC-H7/APC-Cy7BV421/V450BV421/V450BV510/V5

5、00BV510/V500BV421/V450BV605BV605•六种被紫激光激发的染料405nmBV510/V500BV650BV650BV711BV711–基础多聚体:BV421andBV510BV786BV786–串联体:BV605,BV650,BV711andBV786PE561nmPE-CF594•亮的染料PE-Cy5PE-Cy7•减少交叉激光激发BUV395BUV395355nmBUV737BUV737•减少样品制备影响#Lasers22345BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/9BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/10与其他染料的比较BufferCom

6、patibility–SurfaceStainTranscriptionFactorBufferPermIIISolutionStain–Fix/PermStain-Fix/PermBV421BV711BV650PEBV786BV605BV510Fix/Perm-StainFix/Perm-StainBVCD4试剂与PE比较HuCD4BV510HuCD4BV786BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/11BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/1229/18/2014Buffercompatibility:intracellularstaining紫激光配置Unstimu

7、latedCMVpp65SEB检测光学部件需匹配所用的荧光素PECD4g-•许多仪器已经配置可以使用纳米晶体染料IFN•为最大限度地发挥BDHorizonBrilliantViolet的组合优势，仪器可能需要更新配置PEg-CD8IFN•更新配置可提高扩展仪器的性能BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/13BDHorizon™之旅:多色方案设计的新视野/14BDHorizonBrilliantUltraviol