《BD流式原理及应用》PPT课件

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1、BD公司生物科学部流式细胞仪的应用TOHELPALLPEOPLELIVEHEALTHYLIVES成立于1897年位居财富周刊500强的大型跨国公司产品涵盖诸多医疗领域BDBiosciences生物科学系统(全球最大的流式细胞仪生产商/供应商)注射器产品系列：疫苗注射器临床标本采集系统感染性疾病诊断系统在中国各大城市设有代表处市场情况1973年世界第一台商品化的流式细胞仪FACSI由BD公司和美国斯坦福大学共同研制成功1980年北京师范大学引进了中国的第一台流式细胞仪FACSIIBD是全球最大的流式细胞仪生产商和供应

2、商，在全球的占有率为75%，在中国75%在全国各大医院和科研院所，大部分为BD公司的仪器，总计数量已超过700台，如:清华，北大，中科院，军科院等等BD公司流式细胞仪FACSCaliburLSRIIFACSCantoFACSCountFACSAria流式细胞术概述流式细胞术的基本概念流式细胞术（FlowCytometry,简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且能够同时检测快速直线流动状态中的单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人

3、工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量流式细胞仪的检测范围细胞结构细胞大小细胞颗粒度细胞表面面积核浆比例DNA含量与细胞周期RNA含量蛋白质含量细胞功能细胞表面/胞浆/核的特异性抗原细胞活性细胞内细胞因子酶活性激素结合位点细胞受体流式细胞仪的原理散射光信号FALSSensorLaser散射光信号RightAngleLightDetectorCellComplexitySSCForwardLightDetectorCellSurfaceAreaFSCIncidentLightSource前

4、向角散射光（FSC,ForwardScatter）细胞相对大小及其表面积侧向角散射光（SSC,SideScatter）细胞颗粒度及细胞内细胞器的相对复杂性外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后）GranulocytesMonocytesLymphocytes流式细胞仪的检测信号荧光信号使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量荧光信号双色直接染色数据分析数据存储:LISTMODE数据显示:直方图(Histogram)二维点图(DotPlot)等高线图(ContourPlot

5、)密度图(Density)三维图（3DPlot）等单参数直方图分析数据分析直方图分析多参数散点图分析数据分析等高图和密度图分析数据分析三维图分析流式细胞仪的应用流式细胞仪的临床应用HIV免疫分型，CD4绝对计数淋巴细胞亚群分析白血病和淋巴瘤的免疫分型肿瘤的细胞周期和倍体分析网织红细胞计数细胞移植的免疫状态监测干细胞计数阵发性血红蛋白尿HLA-B27检查血小板功能及相关疾病流式细胞仪的科研应用免疫功能研究血小板分析（心脑血管疾病）细胞周期和倍体分析细胞凋亡干细胞研究树突细胞研究肿瘤相关基因表达的研究抗肿瘤药物作用机制

6、以及多药耐药性的研究放疗/化疗疗效的研究流式细胞仪的应用（免疫）淋巴细胞免疫分型淋巴细胞亚群分析CD4绝对计数HIV与SARS的诊断与研究淋巴细胞CD4/CD8分析CD4绝对计数T细胞活化免疫功能和免疫调控的研究淋巴细胞和单核细胞的活化细胞因子的研究淋巴细胞的增殖树突状细胞的研究淋巴细胞亚群分析使用经荧光素标记的特异单克隆抗体，进行多色染色，同时分析淋巴细胞膜上多种白细胞分化抗原（CD分子）的表达，可以将淋巴细胞亚群区分开，进行定性分析各淋巴细胞亚群的百分含量淋巴细胞亚群的绝对计数，进行定量分析淋巴细胞亚群分析根据

7、功能，淋巴细胞主要分为B淋巴细胞（CD19+），与体液免疫有关T淋巴细胞（CD3+），与细胞免疫有关总T和总B可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病NK细胞（CD3-CD16+56+），行使免疫监控功能，能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。淋巴细胞亚群分析根据CD4、CD8表达，T淋巴细胞又分为T辅助/诱导细胞（CD3+CD4+）T抑制/细胞毒性细胞（CD3+CD8+）Th/Ts评价那些自身免疫失调、被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态诊断原发性免疫缺陷病（如先天性无r球蛋白血症）或

8、继发性免疫缺陷病（如AIDS）造血干细胞移植后免疫重建（6个月NK；9个月T、B）Th/Ts：机体免疫功能亢进：自身免疫性疾病，如SLE、类风湿性关节炎等（治疗有效恢复正常）Th/Ts：机体免疫功能低下：AIDS、病毒感染、慢性活动性肝炎和活动性肝硬化、再障、结核、肿瘤等移植后动态免疫监测：急排临床症状出现前1-5天，活化T和Th/Ts持续，>1.