基础化学第十四章现代仪器分析简介

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1、第十四章现代仪器分析简介ModernInstrumentalAnalysis内容提要原子吸收光谱法概述原理原子吸收光谱仪测量分析方法荧光分析法概述光强度与荧光物质浓度的关系内容提要荧光光谱仪定量分析方法及应用色谱法色谱法发展简史色谱仪色谱法分离理论色谱法中的定性和定量方法第一节原子吸收光谱法一、概述原子吸收光谱法(atomicabsorptionspectroscopy,AAS)基于自由原子对辐射的吸收。选择一定波长的辐射光源,使与某一元素原子的基态和激发态跃迁能级对应,对辐射的吸收导致基态原子数减少。辐

2、射吸收与基态原子浓度有关,即与待测元素的浓度相关。通过测定辐射的量,可获得样品中某元素的含量。第一节原子吸收光谱法二、原理原子吸收光谱的产生不同元素核外电子从基态跃迁到第一激发态吸收的能量(E)不同,因而吸收波长()不同:=c/=hc/h=hc/E原子吸收测量的基本关系式符合Lambert-Beer定律:A=-lgT=0.4343KNLK为吸收系数,N为自由原子总数,L为吸收层厚度。第一节原子吸收光谱法三、原子吸收光谱仪光源广泛使用的是空心阴极灯(hollowcathodelamp)。原子化器

3、(atomizer)原子化器的主要作用是有效地将样品中待测元素转变成处于基态的气态原子。它的装置主要包括:喷雾器,雾化器和燃烧器三部分。单色器常用的是平面光栅单色仪。检测系统主要由检测器、放大器、对数变换器、指示仪表组成。原子吸收光谱仪第一节原子吸收光谱法四、测量分析方法校准曲线法配制一系列合适浓度的标准溶液,分别测定吸光度A。以A为纵坐标,浓度或含量c为横坐标,绘制效准曲线。在相同条件下,测定被测试样的吸光度,从标准曲线上用内插法求出未知试样浓度。第一节原子吸收光谱法四、测量分析方法标准加入法取等量的数

4、份被测试样,第一份不加被测元素,其余各准确加入已知浓度的被测元素cs1、cs2、…csn,在相同条件下依次测定吸光度。做出浓度c与吸光度A的曲线。当被测试样中若不含被测元素,曲线应通过原点;如果曲线不通过原点,说明含有被测元素,并且其外延线与横坐标相交处到原点的距离,即为试样中被测元素浓度cx。标准加入法第一节原子吸收光谱法四、测量分析方法灵敏度和检出限灵敏度(S)定义为标准曲线的斜率检出限(detectionlimit,L.D),一般定义为3倍于噪音电平所对应的待测元素浓度。样品的处理第二节荧光分析法

5、一、概述当物质分子吸收光子能量而被激发,然后从激发态的最低振动能级返回到基态能级时所发射出的光称为荧光(fluorescence)根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和物质含量测定的方法称为荧光分析法(fluorometry)第二节荧光分析法一、概述激发光谱和发射光谱荧光是从第一激发态S1的最低振动能级返回基态S0的各振动能级时的光辐射。第二节荧光分析法一、概述激发光谱和发射光谱固定发射波长,测得的光谱称为荧光激发光谱。固定激发波长,测得的光谱称为荧光发射光谱。激发光谱a和发射光谱b第二节荧光分析法

6、一、概述荧光光谱的特点斯托克斯位移(Stokesshift)荧光发射光谱与激发波长无关吸收光谱与发射光谱呈镜像对称关系第二节荧光分析法一、概述荧光寿命和荧光效率荧光寿命f:当除去激发光源,分子荧光强度降低到激发时最大荧光强度的1/e所需的时间。荧光效率又称荧光量子产率,发射荧光的光子数与基态分子吸收激发光的光子数之比:第二节荧光分析法一、概述影响物质发光的因素分子结构分子中须有大的共轭键;刚性平面结构的分子荧光效率高;给电子取代基增大荧光强度,吸电子取代基降低荧光强度。外部因素升高温度可降低荧光强度

7、;溶剂极性的增加荧光强度增加。溶剂的粘度减少降低荧光强度;pH影响弱酸碱荧光物质的荧光强度。荧光熄灭第二节荧光分析法二、光强度与荧光物质浓度的关系根据Lambert-Beer吸收定律:A=-lg=bc,It=Io10-bc荧光强度F正比于被荧光物质吸收的强度Ia和荧光效率F=2.303Iobc=(2.303Iob)cF=Kc第二节荧光分析法三、荧光光谱仪光源单色器样品池检测器第二节荧光分析法四、定量分析方法及应用校准曲线法比例法荧光分析法的应用无机化合物的荧光分析有机化合物的荧光分析其它应

8、用DNA的荧光效率低,常用荧光分子作为探针标记DNA。溴化乙锭(EB)是探测DNA结构的典型的荧光探针分子,在激发波长546nm,发射波长590nm具有荧光强度与DNA数量成正比的特点,可用于定量分析。第三节色谱法一、色谱法发展简史术语固定相;色谱柱;流动相;洗脱液分类根据流动相:气相色谱;液相色谱;超临界流体色谱法改变固定相的材料:吸附色谱法,分配色谱法,离子交换色谱法,凝胶色谱法,生物亲和色谱法等按照固定相的形状:柱色谱法

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