《不同动物来源肠球菌的分离鉴定及毒力因子基因的检测》

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1、中国兽医科学2013,43(10):1021—1027ChineseVeterinaryScience中图分类号:S852.611文献标志码:A文章编号:1673—4696(2013)10—1021~07不同动物来源肠球菌的分离鉴定及毒力因子基因的检测郭秉娇,王熙楚,秦瑶,王苇,周霞,剡根强(石河子大学动物科技学院,新疆石河子832000)摘要:为了探究不同动物来源正常菌群肠球菌携带10种毒力因子基因(asal、ace、esp、cylA、gelE、EF0591、EF3314、asa373、efaA、sprE)的情况、分离株相同毒力因子基因相应序列之间的同

2、源性、与致羔羊脑炎肠球菌和GenBank上登录的人源肠球菌同一基因相应序列的同源性,采用常规细菌分离法结合PCR方法对270份不同地区、不同动物来源的肛试样品进行肠球菌的分离鉴定,同时采用PCR方法检测肠球菌的1o种毒力因子基因,对部分毒力因子基因扩增片段测序并进行同源性和系统进化分析。结果显示,从270份样品中共分离到259株肠球菌,其中13株携带3种毒力因子基因,31株携带4种毒力因子基因,39株携带5种以上的毒力因子基因,不同来源肠球菌所拥有的相同毒力因子基因片段之间的同源性均在9O以上。结果表明,不同动物来源正常菌群肠球菌的不同分离株分别携带1o

3、种毒力因子基因中的部分基因,某些菌株拥有较高的毒力因子基因组合,且这种组合因畜种和养殖环境的不同而存在差异。关键词:肠球菌;分离鉴定;毒力因子基因Isolationandidentificati0nofE,.DcOccfromdifferentanimalsandidentificati0nofvirulencefactorgenesGUOBing—jiao,WANGXi—chu,QINYao,WANGWei,ZHOUXia,YANGen—qiang(CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShiheziUniversit

4、y,Shihezi832000,China)Abstract:EnterococcuswereisolatedfromthesamplesofdifferentanimalsindifferentregionsusingtheconventionalmethodandthespecificPCRinordertoinvestigatethedistributionof10virulencefactorgenes(asal,ace,esp,cylA,gelE,EF0591,EF3314,asa373,efaAandsprE)inthesestrains.T

5、hehomologyofnucleotidesequencefromamplifiedproductsof10virulencefactorgeneswereanalyzedwiththatofotherEnterococcus.259Enterococcuswereisolatedfrom270rectalswabsamples,ofwhich13/259strainshad3/10virulencefactorgenes,31/259carried4/10virulencefactorgenesand39/259hadover5/10virulenc

6、efactorgene.Thehomologyofamplifiedfragmentswasover90comparedwithEnterococcusfromdiffer—entsources.TheresultsindicatedthatthedifferentnormalfloraEnterococcuscarrieddifferentvirulencefactorgenesofthese10genesandhadcombinationsofvirulencefactorgenes,andthecombinationsweredifferentwi

7、thdifferentlivestocksandenvironment.Keywords:Enterococcus;isolationandidentification;virulencefactorgene肠球菌是人和动物肠道正常菌群的重要组成部行研究。但近年的研究表明,肠球菌在医院内的感分,其数量仅次于大肠杆菌,通常将其作为益生菌进染仅次于葡萄球菌,美国医院感染监视系统(NISS)收稿日期:201306—08;修回日期:2013—09—22基金项目:国家自然科学基金项目(31160507);人力资源与社会保障部出国留学人员科研启动项目(2010LX0

8、07);大学生创新创业训练项目(201210759021)作者简介:郭秉娇(19

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