西伯利亚鲟侧线神经丘发育过程的观察

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1、第35卷第1期水生生物学报Vol.35,No.12011年1月ACTAHYDROBIOLOGICASINICAJan.,2011DOI:10.3724/SP.J.1035.2011.00115西伯利亚鲟侧线神经丘发育过程的观察程千千施志仪陈晓武宋佳坤轩兴荣(上海海洋大学水产与生命科学学院,上海201306)摘要:研究对西伯利亚鲟(Acipenserbaerii)的胚后幼鱼进行石蜡切片HE染色,同时利用荧光染料DiA[4-(4-Diethylaminostyryl)-1-methylpyridiniumiodide]对侧线管中侧线神经丘毛细胞特异性标记的特点,示踪了西伯利亚

2、鲟胚后仔鱼各个时期侧线神经丘分化发育的过程。结果显示,西伯利亚鲟侧线管内侧线神经丘毛细胞如纤毛状,呈竖立紧密排列。出膜3d仔鱼眼眶后神经基板发育分化活动剧烈,出膜10d的仔鱼眼眶后方的神经基板分化出眼眶上下侧线神经丘的两个分支,同时眼眶后神经基板进一步向后分化发育在眼眶后部形成躯干侧线神经丘,但整个侧线神经丘还未完全发育完成,待出膜15d时,眼眶上下和躯干侧线神经丘已基本发育完全,出膜22d的仔鱼侧线神经丘发育基本完成。研究为今后深入研究西伯利亚鲟侧线发育过程中的神经分化发育、细胞迁移奠定了初步形态学基础。关键词:西伯利亚鲟;侧线神经;毛细胞;发育中图分类号:Q174文献

3、标识码:A文章编号:1000-3207(2011)01-0115-07侧线管系统是鱼类的重要的感觉器官,每一个布于西伯利亚河流和湖泊,是地球上最为古老的物[1]侧线神经丘聚集成百个神经细胞。侧线管系统是种和鱼类之一,因而具有极高的进化研究价值。本皮肤衍生的感觉器官,有感觉水流、水压、水温、研究采用组织学染色对西伯利亚鲟侧线管内侧线神听觉等机能,管内充满透明黏液,侧线感觉器浸润经丘毛细胞形态进行初步观察,并利用荧光对西伯在黏液中,当水流冲击鱼体,影响管内黏液,引起利亚鲟胚后发育各个时期侧线神经丘毛细胞进行的感觉毛的倾斜,从而把外来刺激传给感觉细胞,进特异性标记,从而追踪西伯

4、利亚鲟侧线神经的发育[24]而通过感觉神经纤维把刺激传递到中枢神经。近过程。来越来越多学者对鱼类侧线胚胎发育过程进行研1材料与方法究。在硬骨鱼中斑马鱼的侧线是从头部基板细胞逐[5,6]1.1实验材料渐发育迁移形成;而在软骨鱼中鲨鱼的前后侧线是表层眼神经的分支,神经节围绕眼睛延伸并西伯利亚鲟幼鱼和胚胎均采自浙江千岛湖鲟龙成一个弧,耳边侧线神经节是由前端吻部侧线神科技有限公司养殖场,成鱼100尾,胚胎500尾,暂经节许多细胞突出而形成。但是,对鲟形目鱼类养于实验室循环水系统当中。(Acipenseriformes)侧线发育方面则鲜有报道。鲟形1.2实验方法目鱼类是一类原始古

5、老的软骨硬鳞鱼类,其在鱼类仔鱼石蜡切片HE染色选取出膜40d的西乃至整个脊椎动物进化史上占有很重要的地位[1]。伯利亚鲟仔鱼,1%PBS溶液反复冲洗后,放入10%作为鲟形目鱼类中重要的一种,西伯利亚鲟甲醛固定,固定好的仔鱼依次经过乙醇梯度脱水充(Acipenserbaerii)隶属鲟形目(Acipenseriformes)鲟科分,石蜡包埋,切成5μm连续切片,贴片后常规脱(Acipenseridae)鲟属(Acipense),为软骨硬鳞鱼,分蜡,然后乙醇梯度复水,常规HE染色,乙醇梯度脱收稿日期:2009-10-26;修订日期:2010-01-25基金项目:上海市科委基础

6、重大项目(073205109);上海市重点学科水生生物学建设项目(S30701)资助作者简介:程千千(1984—),男,河南平顶山市人;硕士研究生;主要从事鱼类神经发育方面的研究。E-mail:qqchengm1@163.com通讯作者:施志仪(1954—),E-mail:zyshi@shou.edu.cn116水生生物学报35卷水,二甲苯透明,最后中性树胶封片,在Olympus眼睛各个部分均基本发育成熟,一条由眼眶后方耳光学显微镜下观察并拍照。部位延伸至眼眶前上方;与此同时,也有一条由神[7]胚后仔鱼侧线发育整体荧光染色因对西经丘组成的弧形从眼眶后方耳部位延伸至眼眶前下

7、伯利亚鲟胚胎及胚后发育的研究较少,故本实验胚部位,眼眶后方耳的部位向鳃延伸一条被荧光重着[8]后仔鱼采样参考施氏鲟胚后发育过程中的分期原则色的神经丘组成的弧线,一直到鳃盖上方部位仍十并根据采样过程中对西伯利亚鲟的胚后发育过程的分明显,但该由神经丘组成的弧线延伸到鳃盖后方观察稍作改动,分别按如下时期取样:卵黄囊期仔荧光信号就变得十分模糊(图2I),越往鳃盖后方荧鱼第3天、晚期仔鱼第10天、第15天和稚鱼期第光信号变得越弱(图2J),到躯干和尾部以后部位荧22天。每个时期随机取西伯利亚鲟仔鱼6条,将取光信号消失。出的仔鱼放入已配制