多囊卵巢动物模型构建的探索

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1、多囊卵巢动物模型构建的探索【关键词】多囊卵巢动物模型【摘要】目的根据多囊卵巢形成的机制,建立一种新的多囊卵巢动物模型。方法给9日龄雌性未成年SD大鼠皮下注射丙酸睾丸酮(1.25mg/只),27日龄再连续9天注射绒毛膜促性腺激素(1.5IU/只)(作为LH的替代物);观察了卵巢形态、血清激素含量。结果与空白组相比较模型组大鼠卵巢呈现多囊性改变,睾酮(T)升高,LH升高。结论该模型与人多囊卵巢综合征典型改变相近似,其病理生理过程较为吻合,可用于多囊卵巢综合征实验研究。关键词多囊卵巢动物模型构建Explorationonestablishmentofpolycysticovaryanimalmode

2、lYouZhaoling,FengGuangrong,TanZhenyu,etal.DepartmentofIntegratedWesternandTraditionalChineseMedicine,HunanCollegeofTCM,Changsha410007.【Abstract】ObjectiveAccordingtotheformationalmechanismofpolycysticovary(PCO),tobuildupanewkindPCOanimalmodel.MethodsThe9daysimmaturefemaleSDratswereinjectedwith1.25mgt

3、estosteroneproˉpionateofeach,thenatthe27thday1.5IUchorionicgonadotrophintwicedailyofeachwereinjected.Ovarianmorˉphologyandserumhormonewereobserved.ResultsInconstrastwiththecontrolgroup,cysticovarieshighlystimulatˉedinthemodelgroup.SerumTandLHlevelwerehigher.ConclusionItissuggestedthatthiskindmodelca

4、nbeusedinthePCOresearch.Keywordspolycysticovaryanimalmodelestablishment多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndrome,PCOS)是妇科常见的生殖功能障碍性疾病,主要表现为由于卵巢的雄激素过多所造成的闭经、多毛、肥胖及无排卵,其发生占生育年龄妇女的5%~10%。目前其发病原因临床尚无定论。建立多囊卵巢综合征动物模型对其病因的基础研究以及指导临床的诊断和治疗有深远的意义。本文提出一种新的PCO动物研究模型建立方法,从形态、内分泌等方面进行了研究,以期能寻找一种理想的PCO病理研究模型。1材料与方法1.1实验动物

5、选用孕18~21天的SD大鼠6只,选取所产幼崽24只,9日龄剔除雄性幼崽,21日龄断乳。均由湖南中医学院动物实验中心提供。给予颗粒饲料喂养,自由饮水。饲料由湖南中医学院动物实验中心提供。合格证编号:200310。1.2试剂丙酸睾丸酮(天津金耀氨基酸有限公司,生产批号:0304071);绒毛膜促性腺激素(HCG)(安徽新力药业公司马鞍山分厂公司生产,批号:030409);放免试剂盒(北京北免东雅生物技术研究所提供)。1.3动物模型的建立按参考文献法[2,3]取出生后9日龄SD大鼠24只,分为模型组和正常对照组各12只,模型组大鼠9日龄颈背部皮下注射丙酸睾丸酮1.25mg/只,27日龄颈背部皮下注

6、射HCG(1.5IU/只),每日2次,连续9天,正常对照组于同期颈背部皮下注射同体积生理盐水。两组分别于36日龄处死。1.4取材1.4.1血清学检查处死前禁食水8h,称重,用25%的乌拉坦(3ml/kg))麻醉大鼠,颈动脉取血5ml,静置5min,3000r/min离心20min,4℃储存,按放免试剂盒说明书测血清中孕酮、雌二醇、睾酮、促卵泡生成素、促黄体生成素的含量。1.4.2卵巢形态学观察取出两侧卵巢组织,放入培养皿中,迅速剥离周围脂肪组织,用精密天平称重,放入10%甲醛中固定,送病理室作光镜检查。1.5数据处理实验资料为计量资料,以ˉx±s表示,组间差异的比较采用双侧t检验。2实验结果2

7、.1大鼠体重及血清激素含量见表1。表1正常组与模型组体重及血清激素含量2.2卵巢卵巢大体解剖学改变:卵巢重量:实验组0.0528±0.0127g(n=24),显著高于对照组(0.0283±0.0047g),(P<0.01);对照组卵巢色泽红,实验组卵巢表面较苍白,体积增大,见较多囊状扩张的卵泡。2.3光镜检查正常组(图1,图2):低倍镜:可见多个黄体及不同发育阶段的卵泡,高倍镜下见卵母细胞发育正常

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