人教版高考总复习生物选修

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1、考纲要求热点提示1.DNA的粗提取与鉴定2．尝试蛋白质的提取和分离3．尝试PCR技术的基本操作和应用1.DNA粗提取的原理、方法、鉴定和注意事项2．血红蛋白的提取和分离的实验原理和方法3．PCR技术与生物体内DNA复制的区别高考要点基础知识小思考：用猪的血液；因为猪的红细胞无细胞核，结构简单、血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。小讨论：①PCR不需要解旋酶，而生物体内DNA复制时需要解旋酶；②PCR需要耐热的DNA聚合酶，而生物体内DNA聚合酶在高温时会变性；③PCR一般需经三十多次循环，而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制。1

2、．实验材料(1)动物：鸡血细(2)植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。知识热点2．几种化学试剂及其作用(1)2mol/L的NaCl溶液：溶解DNA析出DNA。(2)0.015mol/L的NaCl溶液：溶解DNA，鉴定DNA时作溶剂。(3)0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：防止凝血。(4)体积分数为95%的冷酒精溶液：提纯DNA。(5)二苯胺试剂：鉴定DNA。3．方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl浓度为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶液

3、稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl溶液中的部分蛋白质和其他杂质加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，能水解蛋白质加入冷却酒精(95%)DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质加入二苯胺，并沸水浴鉴定DNA①人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。②实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。【例1】下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是()A．DNA在NaCl溶液中的溶解度，随

4、NaCl溶液浓度的降低而减小B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应解析：DNA在NaCl溶液中的溶解规律如图：DNA不溶于酒精等有机溶剂，在沸水浴条件下，DNA遇苯胺显蓝色。答案：B►变式1：下列叙述中错误的是()A．改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B．在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C．用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D．用透析法可除去蛋白质样品中的小分

5、子物质解析：DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl浓度的变化而变化。在0.14mol/LNaCl溶液中DNA的溶解度最小，低于或高于0.14mol/L，DNA的溶解度都会增大。在DNA粗提取实验中就是先把核物质溶解在2mol/LNaCl溶液中，然后逐渐加水，稀释至0.14mol/L时，使DNA析出。答案：A1．PCR原理PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。2．PCR的反应过程(1)变性：

6、当温度上升到90℃以上时，双链DNA解旋为单链，如下图：(2)复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如下图：(3)延伸：温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如下图：3．结果(1)PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。(2)两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。细胞内DNA复制与PCR技术的比较细胞内DNA复制PCR不同点解旋在解旋酶的作用下边解旋边复制80℃～100℃高温解旋，双链完全分开

7、酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNA一般为DNA温度体内温和条件高温相同点①需提供DNA复制的模板②四种脱氧核苷酸作原料③子链延伸的方向都是从5′端到3′端【例2】下列操作过程的叙述中错误的是()A．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸气灭菌B．PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，并在－20℃储存C．PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的枪头都必须更换解析：PCR所用缓冲液和酶从冰箱中取出后应放于冰块上

8、缓慢融化，故C错。答案：C►变式2：一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的()A．1/10B．1/16C．1/25D．1/32解析：一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n，而DNA