秦皮甲素提取纯化工艺及降尿酸作用研究

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1、中图分类号R94UDC61O硕士学位论文学校代码!Q5三3密级公珏秦皮甲素提取纯化工艺及降尿酸作用研究ExtractionandpurificationofAesculinanditseffectOilreducingthelevelofuricacid作者姓名：向小四学科专业：制药工程研究方向：天然药物研究与开发学院(系、所)：中南大学药学院指导教师：向大雄教授答辩委员会主席刁幽中南大学二O一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含获得中

2、南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在本论文中作了明确的说明。作者签名：囱。i、∑丑：日期：垫f三年—L月立一日关于学位论文使用授权说明本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：鱼乳蛆导师签名：匈么迸日期：蹲年—丘月互秦皮甲素提取纯化工艺及降尿酸作用研究

3、摘要一、目的探索秦皮甲素的提取、分离和纯化工艺，并研究其对慢性高尿酸血症模型小鼠尿酸水平和肾功能的影响。二、方法1．秦皮甲素热浸提工艺研究通过单因素实验和正交实验探讨从秦皮中浸提秦皮甲素的最佳工艺，考察乙醇浸提过程中乙醇浓度、料液比、浸提时问、浸提次数以及浸提温度对秦皮甲素转移率的影响。2．秦皮甲素纯化工艺研究采用大孔树脂和重结晶相结合的方法分离纯化秦皮提取液中的秦皮甲素。通过HPDl00、HPD400、HPD500、D101、ADS一7、ADS一17、AB一8这七种大孔吸附树脂对秦皮甲素的纯化效果进行静态实验和动态实验考查，探索纯化秦皮甲素最适合的树脂和最佳的上样条件。3．秦皮甲素对慢性高尿

4、酸血症模型小鼠尿酸水平的影响研究36只昆明种雄性小鼠饲养一周后，随机平均分为6组，依次为空白组、模型组、秦皮甲素高(200mg／kg)、中(100mg／kg)、低(50mg／kg)剂量组以及阳性药物别嘌醇对照组(50mg／kg)。模型组、阳性对照组、秦皮甲素高中低剂量组给予黄嘌呤600mg／kg(ig。)+氧嗪酸钾100mg／kg(ip．)造模，空白组给予同等剂量生理盐水。秦皮甲素高、中、低剂量组采用秦皮甲素混悬液进行灌胃给药，阳性对照组灌胃给予别嘌醇混悬液50mg／kg，模型组和空白组则灌胃给予同等体积的生理盐水，连续7日。于第七日下午给药1h后，摘眼球取各组动物的血样，离心吸取血清采用全自

5、动生化分析仪检测血中尿酸(BUA)、肌酐(CR)和尿素氮(BUN)值，考察秦皮甲素对慢性高尿酸血症模型小鼠BUA、CR、BUN的影响以及对小鼠肾功能的影响。三、结果1．秦皮甲素乙醇浸提工艺研究通过比较各因素对秦皮甲素转移率的影响，秦皮甲素最佳的浸提工艺条件为：乙醇浓度75％，料液比为1：10，浸提温度为65℃，浸提次数为2次，浸提时间为2h／次。2．秦皮甲素纯化工艺研究根据实验结果，本课题选用树脂ADS一7为分离纯化秦皮甲素的最佳分离树脂。最佳上样条件为：上样浓度为0．192mg／mL，最大上样量为4．02mg／g，先以3倍柱体积(3BV)的水洗去杂质，再用30％的乙醇进行洗脱，收集30％乙醇

6、洗脱液的前半部分，放入冰箱中冷藏保存24小时，重结晶后过滤，室温下放置干燥，秦皮甲素纯度可达到97％以上。3．秦皮甲素对慢性高尿酸血症模型小鼠尿酸水平的影响研究结果显示模型组和空白组相比，小鼠的BUA明显升高，差异具有显著性(P

7、白组相比，BUN差异均无显著性。阳性对照别嘌醇组小鼠的CR和BUN均明显高于空白组和模型组以及秦皮甲素高、中、低剂量组，差异具有显著性(P<0．01)。四、结论本课题所优化的秦皮甲素提取纯化工艺提取效果好，制备工艺简单，分离纯度高，为秦皮甲素的工业化生产提供了实验依据。药效学研究表明秦皮甲素具有显著的降尿酸作用，对小鼠肾功能无影响，其用药安全性显著高于别嘌醇。图20幅，表12个，参考文献54篇。关