猫自体骨髓源性神经干细胞移植治疗视皮层损伤的实验研究

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1、第一军医大学硕士学位论文猫自体骨髓源性神经干细胞移植治疗视皮层损伤的实验研究姓名：成文平申请学位级别：硕士专业：神经外科指导教师：柯以铨20030527缩略词对照表(AbbreviatioI心缩写词英文全名中文名称ALLSAn扯nn栅llaumilsuprasylvianareaAMLSAm￡romed／alhteralsagaasylvianareabFGFBasicfibroblastgrowthfactorbFGFRBasicfibroblastgrowth盘c幻rreceptorBrdUBromod

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4、表皮生长因子胚胎精子细胞胚胎干细胞钩回视觉区胎牛血清Y．氨基丁酸神经胶质细胞源营养因子胶质原纤维酸性蛋白辣根过氧(化)物酶LIFLeukemiainhibitoryfactor自血瘸抑制因子．1．缩写词英文全名中文名称LIFRMSCsNestinNeuNNSCsNSCMPBSPGCsH工SPMLSPSRASASABCLmh疵a砌hi岫y自呦rr∞咖MalTOWstromalcellsNeur0Iaal-speeificrmelearproteinNeuraIstemcellsNeuralstemcellsm

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6、胞神经干细胞培养基磷酸盐缓冲溶液原始生殖细胞后外侧回外侧区后中间外侧回区后侧回区维甲酸链霉亲生物素蛋白链霉亲和素生物素过氧化物酶复合物脾状视觉区脑室下区VLSVentrallateralsuprasylvianarea腹外侧回区猫自体骨髓源性神经千细胞移植治疗视皮层损伤的实验研究研究生：成文平导师：柯以铨中文摘要第一部分猫骨髓源性神经干细胞的培养和鉴定目的1、观察家猫骨髓基质细胞体外培养情况；2、探索其诱导分化为神经干细胞的可行性，为家猫骨髓基质细胞作为自体神经干细胞种--7：细胞提供理论依据。材料和方法1

7、，材料：经检疫健康合格的成年家猫20只，雌雄备半，年龄l~2岁，体重2．5~4．Okg。2、方法：氯胺酮肌肉注射麻醉后，从后肢股骨下端内侧抽取骨髓3～5ml，加神经干细胞培养基稀释，然后加入含细胞分离液3--4ml的离心管中，经密度梯度离心后分离得到骨髓基质细胞(Bonern81TOWs1Tomalcells，BMSCs)。分离得到的BMSCs用神经干细胞培养基(NeuralStemcellsmedium，NSCM)重悬浮为(1~2)x105个／ml，种植于24孔培养皿中，给予不同的培养条件进行诱导分化。根

8、据培养基添加血清及因子情况不同分4组：(1)单纯NSCM组；(2)NSCM+FCS(20％终浓度)组；(3)NSCM+LIF(20ng／m1)+bFGF(20ng／m1)组；(4)NSCM+FCS(20％终浓度)+LIF(20ng／rnl)+bFGF(20ng／m11组。．1．根据去非贴壁细胞时间不同分4组：(1)4h组，培养4h去除非贴壁细胞；(2)24h组，培养24h去除非贴壁细胞；(3)48h组，培养48h