新鲜自体骨髓及自体富集骨髓促进脂肪移植成活的实验研究

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1、《巧《碱｜皆ｆ從中钟《據硕±研究生学位论文北京协和医学院研究生院学校代码：１００２３学号：Ｓ２０１２００４０１８硕±学位论文（专业学位）新鲜自体骨髓及自体富集畳髓促进脂肪移植成活的实验研究所院：整形外科医院姓名；邢文珊指导教师：穆大为导师小组：楽杰教授刘春军副教授学科专业；外科学研究方向：组织移植二一完成日期：零五年四月目录中＾：１：摘要Ａｂｓｔｒａｃｔ３刖胃４蚊４献路线７一第部Ａ７实验材料８实验方法９实验结果１０ｉ寸论１１第二部分１３实验材料

2、１３实验方法１３实验结果１４ｉｔ１４论第兰部分１６实验材料１６实验方法１６实验结果１９论２５第四部分２８实验材料２８实验方法２８实验结果２９職３０全文总结３２参考文献３３文献综述３８纖４９独创性声明５０学位论文版权使用授权书５０新鲜自体骨髓及自体富集骨髓促进脂肪移植成活的实验研究中文摘要目的：目前，多种细胞辅助脂肪移植已被证实可有效提离移植脂肪的成活一一率，然而细胞培养、扩增过程繁琐、再次移植风险较高。种能够在次手术中完成、感染及免疫排斥风险小的

3、细胞辅助脂肪移植手段仍然缺乏。本实验研究致力于探讨新鲜自体骨髓及自体富集骨髓改善自体脂肪移植效果及相关机制，为解决自体脂肪移植术后吸收率较高的问题提供思路。。方法：本实验建立了自体脂肪移桂兔耳模型由实验兔路部抽取新鲜自体骨髓；通过梯度密度离也法离也富集得到富集骨髓，升数其中有核细胞数目并使用巧光染料ＰＫＨ２６进行标记。将２４只实验兔随机分为Ｈ组：实验组Ａ，实验组Ｂ及空白对照组。实验组Ａ将新鲜自体骨髓（Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗａｓｐｉｒａｔｅ，ＢＭＡ）１ｍｌ与自体ｌ脂肪颗粒１．５ｍｒ混合后注射于家兔耳部ｍ富集骨髓（Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ；实验组Ｂ将１ｃｏｎ

4、ｃｅｎｔｒａｔｅ，ＢＭＣ）与自体脂肪颗粒１．５ｍｌ混合后注射于家兔耳部；对照组将ＰＢＳ—ｍ缓冲液１ｍｌ与自体脂肪颗粒１．５ｌ混合后注射于家兔耳部。术后１天、２周、４周及１２周进行了小动物活体巧光检测。选取４周及１２周两个时间点将脂肪移植物切取观察，通过移植脂肪大体观察、移植脂肪存活质量、移植物内脂肪细胞成活情况及移植脂肋血管新生情况四个方面评估移植脂肪的成活及移植物内血运重建情。况，并观察骨髓细胞在移植物内的分化情况，初步探讨其作用机制检测手段包括移植物体积、湿重的测量，移植物活组织染色、组织学切片ＨＥ染色及评分、ＣＤ３１免疫组化染色及微血管密度计数。使用ＳＰ

5、ＳＳ１９．０进行方差分析检验，设定Ｐ值为０．０５。结果：术后活体炎光检测结果显示Ｂ组实验兔耳部在移植术后的第、２１天周、４周及１２周均可检测到巧光信号，移植部位Ｗ外的其他区域未检测到巧光信号，说明骨髓细胞可在移植物局部存活至术后１２周。术后４周及１２周，Ａ、Ｂ两组脂肪移植物的湿重及体积均高于对照组（Ｐ＜０．０５）；ＨＥ染色及评分结果显示：、术后４周，ＡＢ两组在脂肪组织完整性方面强于对照组，炎性细胞浸润及纤维结缔组织増生程度低于对照组（ｐ＜０．０５），术后１２周，Ａ、Ｂ两组与对照组在脂肪组织完整性、囊卿及空泡出现程度、炎细胞浸润程度、纤维结缔组织增生情况四个

6、方面均有显著差异（＜０．０５）活组织染色、ＣＤ３１免疫组化染色结果显示：术后ｐ；４周及１２周，Ａ、Ｂ两组活体脂肪细胞及新生微血管数目高于对照组（＜０．０５）。ｐ１同时，通过移植物活姐织染色可观察到骨髓细胞可向脂肪细胞分化并参与血管形成。一结论：自体骨髓及自体富集骨髓辅助脂肪移植是种有效的细胞疗法，可有效促进移植脂肪的成活及血管新生，应用这种方法可Ｗ避免细胞培养及扩增的复杂过程一，节省手术时间，降低感染及免疫排斥风险，在脂肪移植领域具有定的应用价值。关键词：脂肪移植，自体骨髓，富集骨髓，存活率２ＥｘｅｒｉｍｅｎｔａｌＲｅｓｅａｒｃｈ；Ｉｍｒｏｖｅ

7、ｍｅｎｔｏｆＦａｔＧｒａｆｔ：ＳｕｒｖｉｖａｌｗｉｔｈｐｐＡｕｔｏｌｏｏｕｓＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＡｓｉｒａｔｅａｎｄＢｏｎｅＭａｒｒｏｗＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ．ｇｐＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：？化￥；〇１１５ｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｅｄ化ｅｅｖｉｄｅｎｃｅｓｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，ｓｕｃｈａｓａｄｉｏ－ｄｅｉｍｅｓｅｃｈｍ