引起儿童BSI和SSTI的金葡菌的毒力基因谱及分子特征研究

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1、论文题目：曼!起』L童旦墨!塑蔓墨!!的金煎萱的壹力基因谱区盆王挂堑婴窥答辩委员会主席：周建墓麴握：逝婆太堂医堂暄险届箍二匡院答辩委员会成员：奎昌塞塾攮!湿趔医型太堂瞪届箍三匡堕匿尘竖麴援!遏趔．匡型太堂附属筻二医瞳论文答辩目期：三Q二三生五旦．土』∑目温州医学院硕士学位论文目录一，舨中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··6前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·-9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、一17讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一19参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一25致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一26二、综述综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·30三、独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··33㈣4删2㈣2ⅢⅢ，，Ⅲ9姗3㈣2删Y温州医学院硕士学位论文引起儿童胬I和ssTI的金葡菌的毒力基因谱及分子特征研究中文摘要目的：金黄色葡萄球菌(SA)，尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，能够引起广泛的感染，包

3、括皮肤软组织感染、呼吸机相关性感染、肺炎、化脓性关节炎、心内膜炎、骨髓炎、败血症及血流感染。本研究旨在观察儿童血流和皮肤、软组织感染的金葡菌的毒力基因谱以及分子特征。方法：收集金黄色葡萄球菌7l株，分别分离自江西省儿童医院(69株)及温州医学院附属第一医院(2株)2010年1月至20lO年12月，0-7岁儿童血流感染及皮肤、软组织感染的菌株。其中4l株分离于血流感染(BSI)细菌，30株分离于皮肤、软组织感染细菌。纳入标准：出现红斑、肿胀，局部疼痛，白细胞增高、和或发烧。纳入研究后的金黄色葡萄球菌采用革兰氏染色、过氧化氢酶实验、凝固酶试验和V

4、itek微生物分析仪(bioMe’rieu，Marcyl，Etoile，France)进行分离和鉴定，金黄色葡萄球菌ATCC25923作为质控菌株。PCR方法检测金黄色葡萄球菌毒力基因。金黄色葡萄球菌临床分离株的毒力基因和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin．resistantStaphylococcusaureus，MRSA)的SCCmec基因分型采用多重PCR。应用多位点基因序列分型(multilocussequencetyping，MLST)技术和葡萄球菌A蛋白序列分析(spatyping)分型对金黄色葡萄球菌株进行序列分型

5、。结果：1．mecA和pvl基因的检测：7l株金黄色葡萄球菌中，16株mecA为阳性，被判断为MRSA，其阳性率为22．5％(16／71)。16株MRSA中，lo株为血流感染(BSI)菌株，MRSA检出率为24．4％(10／41)；6株为皮肤软组织感染(SSTI)菌株，iRSA的检出率为20．o％(6／30)。在30株SSTI株中，26株为pvl基因阳性，阳性率为86．7％(26／30)；在4l株BSI株中，2l株尸一阳性，阳性率为51．2％(21／41)。SSTI菌株的P订阳性率明显高于BSI菌株(P

6、测菌株中，45株(63．4％，45／71)携带≥10个毒力基因、其中23株(76．7％，23／30)为SSTI菌株，22株(53．7％，22／4])为BSI菌株；每株至少携带一种肠毒素基因。除了areA、tst和SOe检出率为0外，lcaA、sdrC．五』日、曲』6、c』捌，sob，s昭和sei等8个基因的检温州医学院硕士学位论文出率≥75％，而eta、etb、saa．SOC、sod、sob和s“等7个基因的检出率≤25％。与BSI菌株相比，SSTI菌株的Ma、Mb、C17a，clfA、seb、SCC和pvJ基因的检出率更高，而et8、etb

7、和spa的检出率相对较低。所有SSTI菌株没有检出etb,soa和sob，这三种基因只在BSI菌株中被检测出。3．SCCmoc分型：16株MRSA中，l株为SCCmecII，占6．25％(1／16)；2株为SCCmecIII，占12．5％(2／16)；5株为SCCmecIV，占31．25％(5／16)：8株为SCCmecV，占50％(8／16)。4．MLST分型：在7l株被测菌株中，共检测出34种sT型，其中最常见的序列型为STl20(11．3％，8／71)和ST25(11．3％，8／71)，其次STl21(9．9％，7／71)、ST88(8

8、．5％，6／71)、ST59(8．5％，6／71)和ST6(7．0％，5／71)，STl5和STl88分别占3株和2株。在检测的34种sT型中，14种sT型为首次发