支架蛋白RACK1对炎性细胞因子表达的影响

《支架蛋白RACK1对炎性细胞因子表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中图分类号塑窆2UDC鱼!Q硕士学位论文学校代码!Q§塑密级垒珏支架蛋白RACKl对炎性细胞因子表达的影响TheroleofscaffoldRACKlintheproductionofproinflammatorycytokines作者姓名：学科专业：研究方向：学院：指导教师：副指导教师：张大林基础医学免疫学基础医学院张纪岩教授王庆阳论文答辩日期立趔答辩委员会主廖缸中南大学2013年5月IIIIIIIIFIJllHIIIIIIIIIIFIIIIFFIJlIII原创性声明一Y⋯242—408—3本人声明，所呈交的

2、学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：弓出日期：兰互年￡月丝日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采

3、用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：靳签名盔谚期：业必堡日支架蛋白RACKl对炎性细胞因子表达的影响摘要RACKl(ReceptorforActivatedCKinase1)，激活的蛋白激酶C受体1，最早发现RACKl的功能是和PKC结合、增强其活性，因此得名。RACKl是一种支架蛋白，由7个高度保守@Trp．Asp(WD)40结构域组成，分子量为36kDa。RACKl在体内广泛表达，主要参与

4、调控胚胎发育、细胞生长、细胞分化、细胞迁移、细胞凋亡、昼夜节律等多种生命活动过程。有文献报道，RACKl参与调节了多条炎性信号通路，如ⅢK、GSK313，然而关于RACKl对炎性细胞因子表达的影响尚不清楚。目的：本研究选取人单核细胞THPl和原代巨噬细胞为主要研究模型，探讨敲低RACKl对炎性细胞因子表达的影响，及其可能的分子机制。方法：用慢病毒感染等方法敲低RACKl，通过Elisa，免疫印迹、RT-PCR，流式细胞术等方法检测细胞因子表达，炎性通路信号蛋白表达变化等指标。结果：在人单核细胞THPl中，敲低R

5、ACKl导致LPS刺激下的炎性细胞因子IL．6和TNF一仪表达下降，同时伴随着细胞增殖速度的减慢，但对细胞吞噬能力和CDl4表达水平无显著影响；在人原代巨噬细胞中敲低RACKl也导致LPS刺激下的炎性细胞因子IL。6和TNF。0【表达下降。免疫印迹实验结果表明RACKl缺失后不仅导致了MAPK炎性信号通路中JNK、p38的磷酸化水平下降，也导致NF．rd3上游激酶IKK的磷酸化水平下降，并且RACKl的缺失伴有IKK、JNK、p38分子共同上游蛋白IRAKl、TAKl和TRAF6蛋白的表达水平降低。RACKl不

6、影响IRAKl、TAKl和TRAF6的mRNA水平和半衰期，但可以与PKC[3II结合促进IRAKl的优先翻译，而对TRAF6和TAKl的影响尚不清楚。结论：RACKl通过维持IRAKl、TAKl和TRAF6的蛋白水平，实现对下游NF—KB，JNK，p38的调节，从而影响了炎性细胞因子IL一6和TNF一0【的表达，增强PKCl3II的活性可能是RACKl促进炎性细胞因子表达的部分机制。图14幅，表0个，参考文献27篇II关键词：RACKlIL．6；TNF-a；IRAKlTAKlTRAF6分类号：R392IIIT

7、heroleofscaffoldRACKlintheproductionof-一l■DroinllammatorycytotanesAbstractRACK1(ReceptorforActivatedCKinase1，36kDalconsistsofsevenhighlyconservedTrp-Asp40repeatsandisthereforeascaffoldprotein．ItiSubiquitiouslyexpressedandhasbeenimplicatedindiversecellularact

8、ivitiesincludingembryonicdevelopment，cellgrowth，differentiation，migration，apoptosis，andcircadianrhythmclock．SeveralgroupshavereportedthatRACK1regulatestheactivityofmultipleintracellularsignaling