芝麻枯萎病的病原菌鉴定及其基于内生细菌的生物防治研究

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1、硕士硕士学位论文杨辉辉芝麻枯芝麻枯萎病的病原鉴定及其基于内生萎病细菌的生物防治研究的病原菌鉴定及其基于内杨辉辉生细菌的生物防治研究二○一四年六月2014广西大2分类号S432.1密级公开UDC硕士学位论文芝麻枯萎病的病原菌鉴定及其基于内生细菌的生物防治研究杨辉辉学科专业植物病理学指导教师黄思良研究员黎起秦教授论文答辩日期2014.5.21学位授予日期2014.6.25答辩委员会主席吴海燕教授论文评阅人双盲评审广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和

2、致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：□

3、保密，在年解密后适用授权。□不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：日期：指导教师签名：日期：作者联系电话：电子邮箱：芝麻枯萎病的病原鉴定及其基于内生细菌的生物防治研究摘要芝麻是我国重要的油料作物之一。近年芝麻枯萎病严重发生，导致芝麻产量减产严重，并造成了严重的经济损失。明确该病的病原菌是寻找有效防治措施的基础。作者经过分离纯化得到病原菌株（ZY-2），依据柯赫法则确定菌株的致病性后，显微观察形态特征，检测生物学特性，并依据核糖体基因内转录间隔区（rDNA-ITS）序列和翻译延伸因子1α基因（tef）序列对该菌进行分子鉴

4、定，探讨利用内生菌防治芝麻枯萎病的生物防治技术，主要研究结果如下：1、根据病原菌形态、致病性，结合核糖体基因内转录间隔区（rDNA-ITS）和翻译延伸因子la基因（tef）序列分析，将病原菌鉴定为尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum。该菌适宜生长温度为22~31℃，最适生长温度为28℃；在pH2.0~10.0范围内均可生长，以pH6.5~7.5生长最好；供试的11种碳源和10种氮源都能被该菌利用，其中以蔗糖和葡萄糖作为唯一碳源生长最为良好，以硝酸钠和氯化铵作为唯一氮源生长较好，但在以葡萄糖和L-脯氨酸分别作为唯一碳源和氮源的

5、培养基上不产生分生孢子。产胞外酶能力测定结果表明，病原菌株ZY-2可产生果胶酶和蛋白酶，不产生脂肪酶、纤维素酶、淀粉酶。2、作者从健康的芝麻植株体内分离得到166株内生细菌，其中64株对芝麻枯萎病菌具有拮抗活性，分离率为38.6%。菌株C5-35、B5-47、B4-5及A4-2对病原菌生长的抑制作用较强。结合内生菌对幼苗在室内平板和室外盆栽促生试验结果，筛选出3株内生菌（B5-47、A4-2和A3-28）作为供试生防菌。通过对菌株的形态学特征、生理生化测试及16SrDNA序列分析结果，将菌株B5-47、A4-2、A3-28鉴定为枯草

6、芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。菌株A3-28的最适生长温度为30℃，最适生长pH为7；菌株A4-2的最适生长温度为35℃，最适生长pH为8；菌株B5-47的最适生长温度为30℃，最适生长pH为8。对于9种供试碳源，3株内生细菌均不能利用果糖、木糖醇、甘露醇。菌株A3-28均能利用8种供试氮源，而菌株A4-2和B5-47分别不能利用甘氨酸和组氨酸作为供试氮源。I3、盆栽防效试验表明，菌株A3-28、A4-2与B5-47对芝麻枯萎病防治效果分别为50.12%、46.29%和42.74%，表明内生性枯草芽孢杆菌对芝麻枯萎病

7、具有一定的防治效果。关键词：芝麻枯萎病；尖孢镰刀菌；内生细菌；鉴定；生物防治IIStudiesonIdentificationoftheCausalOrganismofSesameFusariumWiltandBiocontrolbasedonendophyticbactertiaYangHuihui(CollegeofAgriculture,GuangxiUniversity,Nanning530004,China)AbstractSesameisoneofthemostimportantoilcropsinChina.Sesam

8、efusariumwiltoccurredseriouslyinrecentyearsandcausedseriouseconomiclossesinsesameproduction.Toclarifythecausalorganis