四角蛤蜊糖胺聚糖的提取、纯化及生理活性研究

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1、分类号:TS254密级:(秘积机密、绝密)学校代码:10057研究生学号:2008837006四角蛤蜊糖胺聚糖的提取、纯化及生理活性研究StudiesontheExtraction,PurificationandPhysiologicalActivityofGlycosaminoglycanfromMactraveneriformis专业名称:海洋生物学指导教师姓名:崔青曼教授研究生姓名:孙晓朋申请学位级别:理学硕士论文提交日期:2011年1月论文课题来源:塘沽区科委学位授予单位:天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明mIIIIIIIlllllllllllllqqlllllllllI

2、MJlLIIIIIY2410901本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容,也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:刹,吼目日日期:20J『年弓月]日知识产权和专利权保护声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持下完成的,其数据和研究成果归属于导师和作者本人,知识产权单位属天津科技大学:所涉及的创

3、造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后,以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:刹)晓月目日期:≥DJ1年弓月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,同意公布论文的全部或部分内容,允许论文被查阅和借阅。本人授权天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密厂】(请在方框内打“√”),在年解密后适

4、用本授权书。本学位论文属于不保密l讨(请在方框内打“、/”)。作者签名:刹、睨同日日期:如fj年弓月7日刷噬各触局醐蝴J『¨月7日纱。如摘要糖胺聚糖是由含已糖醛酸和己糖胺成分的重复二糖单元连接成的直链杂多糖,具有抗凝血、抗肿瘤、降血脂等多种生物学活性。研究表明,贝类中含有丰富的糖胺聚糖。四角蛤蜊是一种重要的海洋食用经济贝类,同时具有较大的药用和保健作用,开展四角蛤蜊糖胺聚糖的提取,纯化和生理活性研究,可以为四角蛤蜊资源的高值化开发利用提供理论依据,为新型药物先导化合物的开发探索一条新途径。本研究的主要内容如下:在单因素试验的基础上,利用SAS软件和响应面分析相结合的方法对四角蛤蜊糖胺聚糖

5、的提取工艺进行了优化。通过试验得到了二次多项式回归模型,该模型能较好的反映各因素与响应值之间的关系。最佳提取工艺的条件是水料比3:1,酶解时间3.5h,酶添加量1.0%。在此条件下,糖胺聚糖的提取率可达0.448%。对糖胺聚糖的粗提物进行纯化以除去蛋白质、色素和无机盐等杂质。一次纯化采用吸附法、透析法和等电点沉淀法得G1,回收率41.54%,其GAG含量由34.46%提高到82.92%;二次纯化采用季铵盐络合法得G2,回收率为87.22%,GAG含量由82.92%提高到95.03%。对纯化后的糖胺聚糖进行紫外光谱扫描和琼脂糖凝胶电泳。紫外扫描光谱显示,纯化后糖胺聚糖在280nm和260n

6、m附近没有明显的吸收峰,说明纯化后样品中蛋白质和核酸含量很低,杂质基本被除去。琼脂糖凝胶电泳显示,与标品相比,四角蛤蜊GAG图谱斑点有明显的拖尾,表明制品中糖胺聚糖种类不均一或分子量分散性较大。对四角蛤蜊糖胺聚糖体外清除自由基和体外抗凝血作用进行了研究。结果表明,其对羟基自由基和超氧阴离子自由基均具有一定的清除作用,具有一定的抗凝血活性,但其作用强度与肝素比相对较弱。关键词:四角蛤蜊;糖胺聚糖;提取;纯化;生理活性ABSTRACTGlycosaminoglycanisakindofcomplexpolysaccharideswhichhadastraight—chain.Duplicat

7、edisaccharideunitswhichhadhexuronicacidandhexosaminewereconnectedtogethertobeglycosaminoglycan.Ithasanticoagulant,antitumor,hypolipidemicandotherbiologicalactivities。Thecontentofglycosaminoglycanisrichinshellfish.Mactr

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