阳春砂多糖的提取、纯化及生物活性研究

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3、曰摘要目的：阳春砂为姜科植物阳春砂AmomumvillosumLour．的干燥成熟果实，具有化湿和胃、温脾止泻、理气安胎等功效。然而目前关于阳春砂多糖(ASP)的研究较少。本实验通过系统化研究阳春砂多糖超声波辅提取工艺，对阳春砂多糖进行分离、纯化，进而对纯化组分进行初步药理试验研究，为开发出理想的阳春砂多糖药品及相应产品提供理论依据。方法：首先采用响应面法(Resp

4、onseSurfaceMethodology，RSM)优化超声波辅助提取阳春砂多糖工艺，对超声辅助提取时间、超声提取温度、水料比、超声提取次数等四个实验因素进行单因素实验考察，在单因素实验结果的基础上进行3因素3水平的Box．BehnkenDesign(BBD)设计，然后按照响应面设计进行试验操作，根据设定的实验结果计算二次线性拟合方程，预测最佳提取条件，最后验证理论数学模型是否符合实际实验；而后在最优提取条件下提取阳春砂粗多糖，将所得粗多糖采用DEAE．纤维素．52层析柱按极性进行梯度洗脱，将不同时间所分离出的洗脱液分别收集合并浓缩干燥，再将初步纯化的粗多

5、糖采用SephadexG．100层析柱进一步纯化，分别收集即得到极性一致、分子量大小较为均一的纯化多糖；将分离所得纯化多糖与粗多糖进行体外抗氧化试验，实验对其清除·02一、·OH一及·DPPIT活性进行考察，以评价其抗氧化活性；最后用环磷酰胺(CTX)诱导免疫能力低下小鼠模型，考察ASP对免疫低下小鼠的免疫器官重量、巨噬细胞吞噬功能、脾溶血素生成的影响，以评价阳春砂多糖的免疫调节活性。成果：1．提取ASP最佳的提取条件为超声提取温度78℃、超声提取时间71min、水料比39(v：m，mL·gJ)，提取2次，在该条件下多糖提取率的预测值为13．22％，验证值为

6、13．04+0．36％(n=3)，理论值与实际值吻合。2．ASP经分离、纯化后得到3个不同纯化组分(ASP．1、ASP．2及ASP．3)，ASP、ASP．1、ASP一2及ASP．3均具有良好的清除·02一、·OH一及·DPPH-活性，ASP．3比粗ASP、ASP．1及ASP．2具有更强的体外抗氧化活性。ASP及其纯化组分对超氧阴离子自由基清除活性要显著优于维生素C。3．ASP能在一定程度上提高小鼠腹腔巨噬细胞的廓清能力及吞噬速度，增加血清中溶血素的含量，增加胸腺和脾脏指数，提高小鼠机体免疫能力。结论：上述研究表明，RSM优化超声波辅助提取ASP工艺参数稳定、

7、可靠；ASP及其纯化组分具有良好的抗氧化效果；ASP具有一定的免疫调节作用，可提高机体免疫能力。说明ASP具有良好的生物活性，可用于进一步研究，开发出相应药品及功能保健品，为阳春砂的发展提供新的平台。关键词：阳春砂多糖；提取；分离纯化；抗氧化；免疫调节Extraction，purificationandbi0IogicaIactiVitjesofpoIysaccharidesfromAmomumvi／／osumLour．SpeciaIty：ChineseMediCiBeAuthor：LiShijieTutor：ZhangDanyanAbstractObjec

8、tive：FructusAmoralthedriedandripefruitofAmomumv／／losumLourfromZingiberaceae．Itisoftenusedtoeliminatedampandimproveappetite，towarmthespleenandcheckdiarrhea．ButtherewaslittleresearchontheASPcurrently．FructusAmomiasatraditionalChineseherbalmedicinetreatmentforgastrointestinaldisorders

9、，whichpolysaccharidehasstr