三七人参皂苷2A的酶法制备及其药理活性的研究

《三七人参皂苷2A的酶法制备及其药理活性的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中山大学硕士学位论文三七人参皂苷-2A的酶法制备及其药理活性的研究姓名：王炜申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：关永源;刘德育2003.6.1三七人参皂昔-2矗的酶法制铸及其药理活性的研究硕士生：导师：专进：摘要王熄关永源教授刘德育教授药理学f三七罄皂棼(Panaxnotoginsengsaponins，PNGs)为人参溅植物中的主嚣有效成分，麒组成艇杂，其中三七人参魑苷单体-2A是PNGs中含量较多靛藏分之一，其育广泛数菱理活往。本室猩对受体操纵的Ca2+调控方面做了大量的工作，已证实从中药曼七总皂瞽中提取鹩有效犟俸成

2、分2A对多赫缀艇受俸费导熬ef+蠹滚其蠢特暴瞧魏隧甄撵用。但在自然羚中三七人参皂瞥．2A的含量甚微，而人参皂苷RbI在三七总皂瞢中含最较高，著登纯晶瓣获得枢对容赫，结梅与三七入参皂荣-2A襁似，Rb}纹姥2A多一个糖基，这个糖基比其它糖揍不稳定，去搏Rb}分子c20链O-Glc—Glc{中的一个B一葡萄糖基，即可得到2A。0一秘的本瀑越疆太参皂营粉{为原料，逶过薅薅反感畜强豹地改变天然皂棼糖基，制得m．2A(在。2A前加上m，校示酶解得到的产物，阻示与天然产物的区别)，研究m．2A在秘避及煮谱澄溪方嚣与2A是否一致。研究其霹

3、大麓主动滁血管平滑肌细胞膜上Ca2+通道的作用与2A相比，有无显著能靛异，判断m．2A与2A豹药理液往是番～致，为三七人参毫蕾．2A静获褥援袋安验蔹据，鼹键繁缍我戮中薮资源，提高中药学的科学含餐，为三七人参皂苷一2A的生产提供高效、廉价、优质的方法，有重鞭的经济效益。{f第一部分酶法制备三七人参皂瞀．2At舞选产§．蘸蘩糖营酶的藿秘，透过发酵培葵，收集糕酶。磁突测定懿活性的方法和条件。以人参皂瞥RbI为底物，缀粗酶酶解，对产物分离，做薄滕色谱分析及高效液相色谱检测，并迸一步徽核磁共振碳谱及氢谱的结构签定。研究酶解反应条l牛优

4、化的因素，提高产率。再分离出三七二醇组皂营，并以之为底物，研究酶解反应条件优化的因素。结暴：1．高效液相色谱(HPLC)结果显示：m一2A的纯度>98％。2．酶解反应的最佼条件：底物浓发1x10。mol·L～，反应潺度504C，pH值4．5，反应时间15小时。3．三七人参皂苷RbI经酶解转化为m．2A，转化率为35％。4．三七二薅缝皂蛰经酶聪转位为m，2A，产搴为8％。5．经薄层饿谱、高效液相色谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱分桥，m一2A与-2A豹仡掌缭梅～致。第二部分三七人参皂苷．2A及m-2A对高K+及Phe诱导的大鼠烹

5、动脉环收缩反应麓影晌用离体血管环实验观察比较2A与m．2A对高K+及phe引起的大鼠主动脉收缭发应黪影镌。蓄先瘦察7"--者对寒r雩；超兹大簸主魂躲盘管环羧缤反应熬影响，然后研究比较了二者对苯肾上腺素(phenylephrine，phe)收缩大鼠离体主动豫环作蠲瀚彩喻，包括对phe收缩血管环平台赣静影确，对phe收缩盘管羹效趋线的影响，对phe收缩作用中因胞内can释放所致的快速收缩作用及Ca2+内流依赖性收缩反应的影响。结果：1．在10．120umol·Lo浓度范围内，2A及m．2A对高K’诱导的觑管环收缩反应无疆显露翅(

6、P>0．05)。Il2．10～160utool·L。浓度范围内，2A及m．2A均可浓媵依赖性的抑制Phe收缭丈藕黪主动黥繇豹露蘑，各浓度煮瓣蠡譬舔竣壤强力蓬筠与爱药蘸肖显著性差异；2A及m-2A的最大抑制率分别为51．4±4．3％及49．64-4．6％，二者无显著性差暴(p>O。05)；m-2A静ECso(27+44-6。2#tool·o‘)与2A静EC∞(29．1±6，5*mol·L-4)亦无显著性差辩(P>O，05)；浓度为80弘tool·L。时，2A及m。2A的抑带0率已分剃可达49．ga：3．7％和48．7±4．8％

7、，为其最大婚割率豹97罄-98篱，提示80#mol·¨1墨接邋茭最大掷裁浓壤。3．2A及m。2A均可使Phe量一效I赫I线右穆，最大效应降低。2A及m·2A抑制Phe霆。效魏线静箍羧援鼗PD25努爨舞：≤4．104-0，11)露(霹．08_+0．17)，二嚣无显著性差异(P>0．05)。4。2A及m．2A均不影响Phe促腿内Ca2+释放所致的快速收缩反成(P>O，05VSpretreatment)但能明疑减弱Phe促胞外ca：’+内流所致的收缩反应(P《O．05Vspretreatment)，撵剿率分裂可达49。84-11．

8、O％鞠48．7±12．3％，二者豹事窜制{乍用无撼著性差异(P>0．05)。J，／结论：鞋上瓷耩提示：m-2A与2A～样，对大鬣主动脉敷篱罕懑惑缨麓袋上困离心引起的VDC开放所致收缩无明显作用；但可特异性融断大鼠主动脉m管平滑肌细胞戚上因ROC的开放导致Ca静内流弓i起的斑管环收缩反应，二