三七皂苷的提取及其生物活性研究

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1、ExtractionandBioactivityofSaponinsinPanaxNotoginsengDissertationSubmittedtoNanjingUniversityofTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementsforthedegreeofMasterofEngineeringByYiZHENGSupervisors:Prof.ChengYAOAssociateProf.ShanYuanZHUJune2008南京工业大学硕士学位论文三七[Pano

2、rNorogi叱昭(BurKJF.H.Chen],又名参三七,田七,为五加科人参属多年草本植物,是一种用途比较广泛的名贵中药,主要分布于我国西南部。三七具有止血、活血、补血、抗冠心病、提高记忆力、滋补等作用。迄今为止,三七皂昔的生物活性研究鲜见报道,本论文在提取三七皂昔的基础上,重点对三七皂昔的生物活性进行了研究。建立了三七总皂昔的质量控制方法。采用薄层色谱法对三七总皂昔进行定性鉴别,香草醛一高氯酸分光光度法测定皂昔的含量,检测波长为560nm,人参皂昔Rgi在0.0083-0.050mg/mL范内呈良好线性关系(

3、r=0.9994),平均回收率为99.5%(n=6),RSD=2.7%。本方法简便、准确、重现性好,可用于控制三七总皂昔的质量。采用正交设计法对三七皂昔超声波辅助提取法和乙醇回流提取法的工艺条件进行了研究。确定乙醇回流提取法工艺为:料液比为1:10,70%乙醇(V/V)提取3次,每次提取时间l・5h。超声波辅助提取法工艺条件为:料液比1:12,水饱和正丁醇超声提取2次,每次提取时间50min,1111度为40C。研究了大孔树脂吸附分离、纯化三七总皂昔的工艺,考察了三种不同类型的树脂对三七总皂昔的静态吸附一洗脱性能的

4、影响,对洗脱溶媒及其用量.吸附容量等纯化工艺参数进行了研究。结果表明,选用D101型大孔树脂,以70%乙醇(V/V)为洗脱液,三七总皂昔的洗脱率达89.5%。通过测定红细胞溶血率,研究了不同部位三七皂昔及三七块根总皂昔(PNS)的溶血性。结果表明:不同部位三七皂昔中,PNS溶血性最小,PNS及流分中,PNS及PNS・1、PNS・2、PNS-5、PNS・6溶血性极小,PNS・3、PNS-4的HD50分别为1060pg/mL和234gg/mL;PNS及流分的溶血性均较小,安全性较大;随PNS各流分的极性增加,溶血性降低

5、;若需增加其安全性,可去除极性较小的部分。通过体外免疫试验对不同部位三七皂昔的免疫活性进行了研究,结果表明,PNS及其各流分的体外活性显著。关键词:三七皂昔不同部位提取溶血性免疫活性ABSTRACTPanaxNotoginseng(BurK.)F.H.Chen,awell-knownmedicinalplant,isperennialherbofaraliaceaePanaxwithwideapplication,whichislargelycultivatedinYunnanprovince.Notoginsen

6、gkeepsfiindionofhemostasiaactivationgblood,enrichingblood,liveningblood,anti-coronaryheartdisease,improvingmemoryandnourishment.Thesaponinsinthisplanthavebeenreportedmorebefore,butthestudiesonthebioactivityofsaponinsarereportedless.Inthisthesis,thesaponinswere

7、extractedanditsbiologicalactivitieswerestudiedindetail.Thewaysofqualitycontrolofsaponinswereestablished.Thinlayerchromatography(TLC)wasusedforqualitativeidentificationofPNSandUV-VIS■spectrophotometryvanillin-perchloricwiththedetectivewavelengthof560nmwasusedto

8、determinethecontentofsaponins.TheLinearityforginsenosideRg]wasobtainedovertherangeof0.0083-0.050mg/mL・Theaveragerecoverywas99.5%andRSDwas2.7%(n=6)・Themethodissimpleandfeasible>high

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