鲍曼不动杆菌噬菌体生物学特性的研究-余静丹

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1、微生物学杂志2013年4月第33卷第2期JOURNALOFMICROBIOLOGYApr．2013Vol．33No．217鲍曼不动杆菌噬菌体生物学特性的研究*余静丹，史红艳，王丹，徐花，孙延波(吉林大学白求恩医学院病原生物学系，吉林长春130021)摘要从污水中分离鉴定鲍曼不动杆菌噬菌体，并对其生物学特性进行分析，为开发针对细菌感染的噬菌体生物制剂提供前期工作。采用双层琼脂法分离可裂解鲍曼不动杆菌的噬菌体，通过负染法电镜观察噬菌体的大小和形态，将噬菌体和宿主菌以不同比例混合，测定噬菌体的最佳感染

2、复数并观察一步生长曲线，提取噬菌体核酸进行酶切电泳分析，通过SDS-PAGE分析噬菌体的结构蛋白和非结构蛋白。成功分离3株可裂解鲍曼不动杆菌的噬菌体(分别命名为ФAb-1、ФAb-2和ФAb-3)，电镜显示噬菌体的头部呈二十面体，直径约50－2nm，有一短尾。噬菌体ФAb-1的最佳感染复数为10，一步生长曲线表明噬菌体在裂解宿主菌时，潜伏期为20min，爆发期为30min，裂解量为190PFU/cell。限制性酶切电泳显示噬菌体ФAb-1的基因组大小约40kb左右，为双股环状DNA。SDS-PA

3、GE的噬菌体蛋白电泳包括7种蛋白，分子量在29～116ku。噬菌体ФAb-1、ФAb-2和ФAb-3对鲍曼不动杆菌具有很强的裂解毒性。根据其形态、结构和噬菌体分类法，鲍曼不动杆菌噬菌体属于有尾病毒目，足尾病毒科。关键词鲍曼不动杆菌;噬菌体;一步生长曲线中图分类号Q939．48文献标识码A文章编号1005－7021(2013)02－0017－07doi:10．3969/j．issn．1005－7021．2013．02．004BiologiccharacteristicsofBacteriophag

4、esspecifictoAcinetobacterbaumanniiYUJing-dan，SHIHong-yan，WANGDan，XUHua，SUNYan-bo(Dept．ofPathogenobiol．，NormanBethuneColl．ofMed．，JilinUni．，Changchun130021)AbstractBacteriophagesspecifictoAcinetobacterbaumannii(BAB)isolatedfromsewagewasinvestigatedfori

5、tsbi-ologicalcharacteristicstoprovideearlystage'sworkforthedevelopmentofbio-preparationofphageaimingatbacterialinfection．SplittableBABwasisolatedandidentifiedusingdouble-layer-agarmethod．Itssizeandmorphologywasob-servedandexaminedbyelectronmicroscopy

6、usingnegative-staining．Theoptimalmultiplicityofinfectionandone-stepgrowthcurveofthephagesweremeasuredbymixinghostbacteriaandthephagesindifferentproportions．Theextrac-tedgenomesofthephageswereevaluatedonelectrophoresisanddigestedwithrestrictionenzymes

7、．SDS-PAGEwasemployedforanalysisofthestructuralandnon-structuralproteinsofthephages．AnditwassuccessfullyisolatedthreesplittableBABrespectivelynamedasФAb-1，ФAb-2andФAb-3，transmissionelectronmicroscopyshowedthatheadofthephagesassumedanicosahedra，50nmind

8、iameter，havingashorttail．Themultiplicityofinfectionofphage－2ФAb-1was10，andone-stepgrowthcurverevealedthatthelatentphasewas20min，andtheeruptive30min，andthesplittingamountofphageФAb-1was190PFU/infectedcells．Restrictionenzymeelectrophoresisshowedthatthe