鲍曼不动杆菌oxa

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1、鲍曼不动杆菌OXA【摘要】目的研究临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌的OXA-23、OXA-24耐药基因研究。方法用微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（MIC值）；PCR检测OXA-23、OXA-24耐药基因，并对扩增出的基因测序比对。结果90株鲍氏不动杆菌，均为多重耐药菌株，其中同时对5种抗生素耐药的占81.6%；检出6株携带OXA-23基因（全部对美罗培南和亚安培南耐药）、均未检出OXA-24基。结论某医院流行产OXA-23型酶的菌株，需要采取措施防止其进一步传播。【关键词】鲍曼不动杆菌多重耐药耐药基因鲍曼不动杆菌广泛存在于医院环

2、境中，如呼吸机设备、消毒液、透析机、水龙头等1，是最常见的条件致病菌之一，可以引起多种医院感染.freela公司；PCR引物由博迈德科技发展有限责任公司合成，胶回收试剂盒购自Promega公司。主要仪器：台式低温高速离心机（江苏省太仓医疗器械厂），IC测定采用IC）测定，根据美国临床实验室标准委员会（CLSI）2标准判断结果。大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和肺炎克雷伯ATCC70060作为质控菌。1.4基因PCR检测检测目的基因引物序列见表1。表1目的基因引物序列及产物基因检测：PCR反应体系均为

3、50μl：10×PCR反应缓冲液5μl、2.5mmol/LdNTP4μl、10μmol/L上、下游引物各2μl、TaqDNA聚合酶1.0U、DNA模板100ng。PCR反应条件：94℃预变性5min；94℃25s，50℃45s，72℃90s，30个循环；72℃延伸10min。1.5测序和数据处理对扩增阳性株PCR产物进行测序（上海生工）和序列比对（用软件DNAMAN5.2.2）。采用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析，P0.05即为差异有统计学意义。2结果2.1标本类型90株鲍曼不动杆菌中，来源于痰标本最多，为82株，占

4、91.2%；其他标本依次为分泌物3株（3.3%），尿液2株（2.2%）。2.2病区分布90株鲍曼不动杆菌中，分离自ICU最多，为30株，占33.2%；其他依次为呼吸内科18株（20.0%）、神经外科病房7株（7.8%）、急诊科6株（6.7%）等。2.3MIC法药敏结果美罗培南（MEM）、亚胺培南(IPM)敏感率分别为58.9%、51.1%，头孢哌酮/舒巴坦（CFP/SB）敏感率为30.0%、左氧氟沙星(LEV)敏感率为21.1%、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)敏感率20.0%、阿米卡星（AKN）、头孢他啶（CAZ）敏感率分别为1

5、6.7%和15.6%。详见表2。表2鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药谱（数量，%）2.4耐药基因扩增结果采用特异性引物对90株鲍曼不动杆菌分离株进行耐药基因扩增，扩增产物经1.3%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察特异性条带。结果有10株OXA-23基因阳性，阳性率为10%；未扩增出OXA-24耐药基因。耐药基因型代表性菌株PCR扩增产物电泳结果见Fig.1。Fig.1ThePCRproductofOXA-23generunon1.3%(anniilsolates3讨论β-内酰胺酶基因是鲍曼不动杆菌最主要的耐药基因，包括超广谱β-内酰胺

6、酶类（属A类，包括TEM-型、SHV-型、SIM-型、PER-型等基因）、金属酶类（属B类，包括IMP和VIM基因）、OXA型酶（属D类）等2,3。OXA-23型酶，水解青霉素和头孢菌素、碳青霉烯，使菌株产生对亚胺培南类抗生素的耐药性4。鲍曼不动杆菌主要分布于重症监护病房(ICU)，占33.2%，其他依次为呼吸内科18株（20.0%）、神经外科病房7株（7.8%）、急诊科6株（6.7%）等，并且在所有标本类型中痰标本的检出率最高，占91.2%。鲍曼不动杆菌的耐药谱广，不易被抗菌药物所清除，感染后治疗非常棘手，特别是对那些免疫功

7、能低下的危重患者将会导致非常严重的后果。D类碳青霉烯酶对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶的水解活性较低，但常同时合并外膜通透下降和(或)主动外排系统增强等，因此耐药性较强4。故对OXA-23型β-内酰胺酶基因流行病区，应及时采取有效措施，防止高耐药和多重耐药株的进一步传播，以免给今后的治疗带来困难。也对医院不合理用药提出警告，在治疗不动杆菌引起感染时,必须合理使用抗菌药,避免多重耐药现象再次发生。在医院间转移病人时必须注意鉴定和追踪耐药不动杆菌5。